Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HER2/ErbB2 umano per FC - P04626

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HER2/ErbB2

• Recettore tirosin-chinasico appartenente alla famiglia dei recettori del fattore di crescita epidermico (EGFR/ErbB), che svolge la funzione di componente essenziale dei complessi recettore-neuregulina, sebbene le neureguline non vi si leghino direttamente. Richiede un corecettore per il legame con il ligando.
• In seguito all'attivazione, media segnali a valle, tra cui la via MEMO1-RHOA-DIAPH1, che inibisce GSK3B, portando alla stabilizzazione dei microtubuli sulla membrana cellulare tramite APC, CLASP2 e MACF1 e regolando così la morfologia e la motilità cellulare.
• Si localizza anche nel nucleo, dove agisce come fattore di trascrizione legandosi al promotore di PTGS2/COX-2 nella sequenza 5'-TCAAATTC-3' per attivare la trascrizione, e co-attiva l'espressione di CDKN1A con STAT3 e SRC. Inoltre, potenzia la sintesi di rRNA e la traduzione proteica.
• La localizzazione subcellulare comprende la membrana cellulare, le increspature di membrana, gli endosomi precoci, il citoplasma (regione perinucleare) e il nucleo, riflettendo i suoi ruoli dinamici nella segnalazione e nella trascrizione.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'autofosforilazione dei residui di tirosina in seguito alla stimolazione con il ligando; la proteina è inoltre una glicoproteina con ponti disolfuro.
• È sovraespresso in diversi tessuti tumorali, inclusi i tumori mammari primari e i tumori dell'intestino tenue, dell'esofago, del rene e della bocca, ed è un oncogene ben noto, frequentemente amplificato o mutato nei tumori.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è direttamente coniugato con , un fluoroforo verde brillante, eliminando la necessità di una colorazione secondaria nella citometria a flusso. Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare e le specifiche condizioni sperimentali.
• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 23-652), suggerendo che l'anticorpo si leghi probabilmente a HER2 sulla superficie cellulare. Per la FC, utilizzare cellule vive e non fissate per preservare la colorazione della superficie; se è necessaria la fissazione, verificare che l'epitopo rimanga accessibile dopo la fissazione.
• Includere controlli isotipici e controlli di compensazione appropriati, soprattutto in combinazione con altri fluorofori. Si noti che il peso della proteina HER2 è di circa 138 kDa (previsto), ma migra a circa 185 kDa nella SDS-PAGE a causa della glicosilazione; questa banda può essere osservata nei lisati di cellule che sovraesprimono HER2.

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