Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-umano IL-6R/CD126 per citometria a flusso (intracellulare) - P08887

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IL-6R/CD126

• La subunità alfa del recettore dell'interleuchina-6 (IL-6R, CD126/gp80) è una glicoproteina transmembrana che esiste in una forma legata alla membrana e in un isoforma solubile (sIL6R) generata da splicing alternativo e proteolisi.
  Riferimenti correlati: PMID:28060820

• L'IL-6R legato alla membrana si lega all'interleuchina-6 (IL-6) con bassa affinità; la trasduzione del segnale richiede l'associazione con il co-recettore gp130 per attivare le vie JAK/STAT, MAPK e altre, regolando le risposte immunitarie, le reazioni di fase acuta e l'ematopoiesi. La segnalazione classica tramite IL-6R di membrana è prevalentemente rigenerativa e antinfiammatoria, con espressione limitata principalmente agli epatociti e a determinati sottogruppi di leucociti.
  Riferimenti correlati: PMID:28265003, PMID:30995492, PMID:31235509

• L'IL-6R solubile (sIL6R) agisce come agonista formando un complesso IL-6:sIL6R che si lega al gp130 su cellule prive di IL-6R di membrana, consentendo la segnalazione trans dell'IL-6. La segnalazione trans è pro-infiammatoria, contribuisce alle malattie infiammatorie croniche, induce la produzione di VEGF e regola l'omeostasi energetica e del glucosio nel sistema nervoso centrale.
  Riferimenti correlati: PMID:21990364, PMID:12794819

• Nella segnalazione a cluster, i complessi IL-6:IL-6R legati alla membrana su una cellula attivano il gp130 su cellule adiacenti; questa modalità è utilizzata dalle cellule dendritiche per promuovere la differenziazione Th17 dei linfociti T CD4⁺ naive.

• L'IL-6R è espresso sui leucociti mononucleati del sangue periferico e sugli epatociti; sIL6R è rilevabile a bassi livelli nel siero e nelle urine. Approssimativamente l'1–20% del sIL6R plasmatico origina dallo splicing alternativo.
  Riferimenti correlati: PMID:28060820

• La regione extracellulare contiene domini simili alle immunoglobuline e un modulo di omologia del recettore delle citochine, stabilizzati da legami disolfuro. La proteina subisce glicosilazione N, importante per il legame del ligando e la stabilità del recettore.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (aa 20–358); l'anticorpo può riconoscere sia l'IL-6R legato alla membrana che il sIL6R. Per la citometria a flusso intracellulare, ottimizzare la fissazione e la permeabilizzazione per catturare i pool recettoriali intracellulari minimizzando il fondo derivante dalle forme solubili.
• Raccomandiamo di includere controlli knockout o knockdown per IL-6R per confermare la specificità della colorazione nel vostro sistema sperimentale.
• Il coniugato diretto elimina i passaggi con anticorpo secondario e riduce i tempi del saggio; tuttavia, si consiglia la titolazione per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale nel vostro specifico modello cellulare.
• Poiché il sIL6R può essere presente nei surnatanti di coltura o nei fluidi corporei, assicurare un lavaggio accurato dopo la colorazione per rimuovere i complessi recettore solubile-anticorpo non legati.

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