Anticorpo Monoclonale Rabbit anti-Uomo KIR2DL2/KIR2DL3 per IF/ICC e FC - P43628

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di KIR2DL2/KIR2DL3

• Le proteine bersaglio KIR2DL2 e KIR2DL3 appartengono alla famiglia dei recettori delle cellule killer simili alle immunoglobuline (KIR). I dettagli funzionali seguenti derivano dalla caratterizzazione di KIR2DL3 (UniProt P43628).
• KIR2DL3, noto anche come CD158b, NKAT2 e recettore p58 NK, è un recettore inibitorio espresso sulle cellule natural killer (NK).
• Si lega specificamente agli alleli HLA-C (HLA-Cw1, HLA-Cw3 e HLA-Cw7), sopprimendo così l'attività delle cellule NK e prevenendo la lisi delle cellule bersaglio.
• Il recettore è una proteina transmembrana localizzata sulla membrana cellulare, classificata come glicoproteina di membrana di tipo I a passaggio singolo in base alle sue caratteristiche strutturali.
• Strutturalmente, contiene domini simili alle immunoglobuline e richiede legami disolfuro per un corretto ripiegamento, come indicato dalle sue parole chiave proteiche.
• L'impianto alternativo del gene KIR2DL3 produce più isoforme, che possono presentare variazioni nella specificità per il ligando o nella capacità di segnalazione.
• Inoltre, subisce modifiche post-traduzionali, inclusa la glicosilazione, comune tra i recettori immunitari e che influenza l'espressione sulla superficie cellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (aa 22-245) di KIR2DL3, che è probabilmente in grado di presentare epitopi nativi adatti al riconoscimento sia di KIR2DL2 che di KIR2DL3 sulla superficie cellulare.
• Per la citometria a flusso (FC), il coniugato diretto elimina la necessità di rilevazione con anticorpo secondario, riducendo il fondo e semplificando il protocollo di colorazione. Assicurarsi di effettuare una compensazione adeguata in caso di combinazione con altri fluorofori.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), le fasi di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate in base alla localizzazione del bersaglio sulla membrana plasmatica. È possibile utilizzare la colorazione senza permeabilizzazione per rilevare i recettori localizzati sulla superficie.
• Dato che l'espressione del recettore è limitata alle cellule NK e ad alcuni sottogruppi di linfociti T, utilizzare un controllo positivo pertinente come le cellule mononucleate del sangue periferico umano (PBMC) o le linee cellulari NK per la validazione iniziale.
• Le prestazioni dell'anticorpo possono variare con metodi di preparazione dei campioni diversi; titolare l'anticorpo (ad es. 0,1-1 µg/mL) per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il vostro saggio specifico.
• La reattività crociata con KIR2DL2 umano è prevista in base all'omologia di sequenza; tuttavia, confermare la specificità nel vostro sistema modello utilizzando appropriati controlli knockout o knockdown se necessario.

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