Anticorpo monoclonale coniglio anti-Umano LAMP1/CD107a per citometria a flusso intracellulare - P11279

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di LAMP1/CD107a

• LAMP1/CD107a, codificata dal gene LAMP1, è una proteina di membrana lisosomiale pesantemente glicosilata, nota anche come LGP120 e CD107a.
• Gioca un ruolo centrale nella biogenesi dei lisosomi e nella regolazione del pH inibendo il canale del protone TMEM175, facilitando così l'acidificazione lisosomiale necessaria per l'attività delle idrolasi (PubMed:37390818). Riferimenti correlati: PMID:37390818
• Nelle cellule NK, LAMP1/CD107a è critica per la citotossicità mediando il movimento dei granuli e il traffico della perforina verso i granuli litici, e protegge le cellule NK dall'auto-danno da parte dei loro stessi contenuti citolitici (PubMed:2022921, 23632890, 23847195). Riferimenti correlati: PMID:2022921 PMID:23632890 PMID:23847195
• Presenta ligandi carboidratici alle selectine, contribuendo all'adesione cellulare (PubMed:7685349). Riferimenti correlati: PMID:7685349
• Agisce come recettore per il virus Lassa, promuovendo l'ingresso e la fusione virale, e supporta la clivaggio mediata da FURIN della proteina di fusione del virus della parotite (PubMed:24970085, 25972533, 27605678, 29295909). Riferimenti correlati: PMID:24970085 PMID:25972533 PMID:27605678 PMID:29295909
• A livello subcellulare, LAMP1/CD107a si localizza ai lisosomi, endosomi tardivi, endosomi, membrana cellulare e membrane dei granuli citolitici.
• Le modifiche post-traduzionali includono un'ampia glicosilazione N-legata, la formazione di legami disolfuro e lo splicing alternativo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Dato che questo anticorpo targeting un epitopo intracellulare (immunogeno: amminoacidi 29-382), è destinato alla citometria a flusso intracellulare. Ottimizzare i protocolli di permeabilizzazione e fissazione utilizzando i controlli appropriati.
• è un fluoroforo rosso lontano luminoso; assicurarsi di una corretta compensazione quando si utilizza in multiplexing con altri coloranti e utilizzare un controllo non marcato per verificare il legame non specifico.
• Validare la colorazione dell'anticorpo in linee cellulari umane che esprimono LAMP1/CD107a; i tipici modelli di colorazione lisosomiale possono essere confermati dalla co-localizzazione con marcatori lisosomiali.
• Per i saggi di degranulazione (es. attivazione delle cellule NK), questo anticorpo intracellulare richiede la permeabilizzazione, quindi potrebbe rilevare la proteina cellulare totale. Regolare di conseguenza le strategie di gating.
• Conservare nelle condizioni raccomandate e proteggere dalla luce per preservare la stabilità del fluoroforo.

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