Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Megalin/LRP2 umano per citometria a flusso (intracellulare) - P98164

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Megalin/LRP2

• La Megalin, nota anche come LRP2 o gp330, è un grande recettore transmembrana (521 kDa) appartenente alla famiglia dei recettori delle lipoproteine a bassa densità, codificato dal gene LRP2 nell'uomo.
• Funziona come recettore endocitico multiligando, collaborando con la cubilina per mediare la rimozione di un'ampia gamma di ligandi, tra cui lipoproteine, vitamine, ormoni e farmaci, dal filtrato glomerulare e da altri fluidi extracellulari.
• Nel tubulo prossimale renale, la megalina media il riassorbimento di molecole essenziali come la 25-idrossivitamina D3, la selenoproteina P, la mioglobina e i complessi della metalloproteinasi della matrice 2, contribuendo all'omeostasi renale.
• Svolge un ruolo fondamentale nella gestione renale dei metalli pesanti internalizzando il cadmio legato alla metallotioneina e altri metalli tossici, un processo supportato da evidenze sperimentali. Riferimenti correlati: PMID:15126248
• La megalina internalizza anche la proteina anti-apoptotica survivina/BIRC5, che può proteggere le cellule renali dai danni durante l'ischemia o in seguito a lesioni. Riferimenti correlati: PMID:23825075
• Oltre che nel rene, la megalina è espressa negli epiteli assorbenti, tra cui la placenta e il plesso coroideo, dove media il trasporto della leptina attraverso la barriera ematoencefalica e facilita l'assorbimento delle vitamine legate agli ormoni.
• A livello subcellulare, la megalina si localizza sulla membrana cellulare apicale, nelle fossette rivestite di clatrina e negli endosomi, ed è inoltre rilevata nelle proiezioni delle cellule neuronali, come dendriti e assoni, sottolineando il suo ruolo nella segnalazione neuroepiteliale.
• Le parole chiave associate alla megalina includono endocitosi, glicoproteina, sordità, neurogenesi e variante patologica, riflettendo la sua ampia importanza fisiologica e il suo legame con le patologie umane.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione intracellulare della megalina umana (amminoacidi 4446–4655), rendendo questo anticorpo adatto alla citometria a flusso intracellulare dopo la permeabilizzazione cellulare.
• Ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per il tipo cellulare specifico, al fine di garantire l'accessibilità dell'anticorpo all'epitopo citoplasmatico.
• Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per la colorazione; le diluizioni iniziali tipiche possono essere determinate utilizzando cellule di controllo positive, come le cellule epiteliali del tubulo prossimale renale o i citotrofoblasti placentari.
• Validare la specificità utilizzando linee cellulari con LRP2 sottoposto a knockdown o linee cellulari negative, per confermare un legame aspecifico minimo.
• Si noti che il coniugato è fotostabile e brillante, ma è necessario evitare l'esposizione prolungata alla luce e utilizzare set di filtri appropriati per il rilevamento.

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