Anticorpo monoclonale di coniglio anti-NT5E/CD73 umano per FC - P21589

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NT5E/CD73

• NT5E/CD73 è un'ecto-5'-nucleotidasi che catalizza l'idrolisi dell'AMP ad adenosina, svolgendo un ruolo chiave nella segnalazione purinergica e nella generazione di adenosina.
• Mostra specificità di substrato per i ribonucleotidi monofosfato rispetto alle forme desossiribosiche, con attività nei confronti di IMP, UMP, GMP, CMP, dAMP, dCMP, dTMP, NAD e NMN. Riferimenti correlati: PMID:21933152, PMID:22997138, PMID:23142347, PMID:34403084
• È ancorata alla superficie cellulare tramite una porzione GPI, localizzandosi esclusivamente nella membrana cellulare.
• Il sito attivo richiede il legame dello zinco e la proteina forma ponti disolfuro importanti per la stabilità strutturale.
• Attraverso lo splicing alternativo vengono prodotte molteplici isoforme, che possono modulare l'attività enzimatica o la localizzazione.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked, che può influire sul ripiegamento e sulla funzione della proteina.
• Le varianti genetiche di NT5E sono associate alla calcificazione delle articolazioni e delle arterie (CALJA) e ad altre condizioni patologiche, come indicato dalla parola chiave "Disease variant".

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante contenente gli amminoacidi 27–547 di NT5E/CD73 umano, corrispondenti all'intero dominio extracellulare. Questo design prende di mira l'epitopo nativo esposto sulla superficie.
• Per la citometria a flusso (FC), titolare l'anticorpo per stabilire la diluizione ottimale per il tipo cellulare e il protocollo di colorazione utilizzati. Includere un controllo isotipico e, se possibile, una linea cellulare di controllo positivo nota per esprimere CD73.
• Poiché CD73 è ancorato al GPI, considerare la possibilità che venga rilasciato o disperso nel surnatante in determinate condizioni; includere controlli appropriati per garantire una colorazione superficiale specifica.
• Poiché questo anticorpo è direttamente coniugato con , elimina la necessità di un anticorpo secondario, semplificando il protocollo e riducendo il background.
• Come per qualsiasi anticorpo, si raccomanda la validazione nel contesto biologico pertinente, soprattutto quando si studiano popolazioni cellulari rare o bassi livelli di espressione.

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