Coniglio anti-Umano Fosfo-PI3K p85α (Y467)/p85β (Y464)/p55γ (Y199) Anticorpo Monoclonale per Citometria a Flusso (Intracellulare) - P27986 / O00459 / Q92569

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione delle Sottounità Regolatorie PI3K (p85α/p85β/p55γ)

• La sottounità regolatoria alfa della fosfatidilinositolo 3-chinasi (PIK3R1) codifica per la sottounità regolatoria p85α, che esiste in multiple isoforme tramite splicing alternativo, inclusa l'isoforma 2 espressa nel muscolo scheletrico e nel cervello, e a livelli inferiori nel rene e nel muscolo cardiaco.
• Contiene un dominio SH3 e due domini SH2 che mediano il legame ai residui tirosina fosforilati sui recettori tirosin chinasi attivati e sulle proteine adattatrici, collegando le sottounità catalitiche p110 alla membrana plasmatica.
• Funziona come adattatore critico nella segnalazione PI3K/AKT, necessario per l'assorbimento di glucosio stimolato dall'insulina e per la sintesi del glicogeno; agisce anche a valle di FGFR, KIT, PDGFRA/B e ITGB2. Riferimenti correlati: PMID:17626883, PMID:19805105, PMID:7518429
• Modula la risposta allo stress del reticolo endoplasmatico promuovendo la translocazione nucleare dell'isoforma 2 di XBP1, migliorando la tolleranza epatica al glucosio sotto sovraccarico metabolico. Riferimenti correlati: PMID:20348923
• Le sottounità regolatorie p85β (PIK3R2) e p55γ (PIK3R3) condividono omologia strutturale con p85α e contengono siti di fosforilazione analoghi, sebbene la loro distribuzione tissutale e le loro funzioni specifiche possano variare.
• Le parole chiave da UniProt includono Fosfoproteina, dominio SH2, dominio SH3, Splicing alternativo, Citoplasma e coniugazione Ubl; la proteina è soggetta ad acetilazione e ubiquitinazione.
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, dove interagisce con recettori di membrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente alla Y467 della PI3K umana p85α; la reattività incrociata con siti omologhi fosforilati in p85β (Y464) e p55γ (Y199) è intesa sulla base della conservazione della sequenza, ma l'allineamento delle sequenze dovrebbe essere verificato per considerazioni off-target.
• Per la citometria a flusso intracellulare, ottimizzare i protocolli di permeabilizzazione e fissazione per preservare gli epitopi fosforilati; utilizzare controlli specifici fosforo appropriati e condizioni di stimolazione (es. privazione di siero seguita da trattamento con fattori di crescita) per confermare la specificità del segnale.
• Dato che l'anticorpo è coniugato direttamente ad , non è necessario un anticorpo secondario, riducendo il background; includere controlli di compensazione appropriati quando si multiplexa con altri fluorofori.
• Considerare la validazione in linee cellulari umane rilevanti note per esprimere le sottounità PI3K e fosforilare questi siti dopo l'attivazione dei recettori dell'insulina o dei fattori di crescita.

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