Coniglio anti-Umano Fosfo-PI3K p85α (Y467)/p85β (Y464)/p55γ (Y199) Anticorpo Monoclonale per Citometria a Flusso Intracellulare - P27986 / O00459 / Q92569

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione delle Subunità Regolatorie PI3K (p85α/p85β/p55γ)

• La subunità regolatoria della fosfatidilinositolo 3-chinasi (PI3K) p85α (codificata da PIK3R1) è una proteina adattatrice che svolge un ruolo critico nel mediare l'attivazione della via di segnalazione PI3K/AKT. Contiene domini SH2 e SH3 che si legano a residui tirosina fosforilati su chinasi dei recettori tirosinici attivati e proteine adattatrici, reclutando la subunità catalitica p110 alla membrana plasmatica per produrre PIP3 e propagare segnali a valle. Riferimenti correlati: PMID:17626883, PMID:19805105, PMID:7518429
• Questo anticorpo è progettato per riconoscere le forme fosforilate di tre subunità regolatorie PI3K: p85α (PIK3R1), p85β (PIK3R2) e p55γ (PIK3R3), specificamente nei siti conservati di fosforilazione della tirosina Y467 (p85α), Y464 (p85β) e Y199 (p55γ). Questi eventi di fosforilazione sono associati all'attivazione della segnalazione PI3K a valle dei recettori dei fattori di crescita.
• La p85α è necessaria per l'assorbimento di glucosio stimolato dall'insulina e per la sintesi del glicogeno nei tessuti sensibili all'insulina e svolge un ruolo nella segnalazione in risposta a vari recettori dei fattori di crescita (es. FGFR, KIT, PDGFR). Modella inoltre la risposta cellulare allo stress ER promuovendo la translocazione nucleare dell'isoforma 2 di XBP1, contribuendo così al miglioramento della tolleranza al glucosio. Riferimenti correlati: PMID:20348923
• A livello subcellulare, la p85α è localizzata prevalentemente nel citoplasma, dove interagisce con recettori di membrana dopo stimolazione.
• L'isoforma 2 della p85α mostra un'espressione tessuto-specifica, essendo presente nel muscolo scheletrico e nel cervello, e a livelli inferiori nel rene e nel muscolo cardiaco. A livello proteico, le isoforme 2 e 4 sono rilevate nel muscolo scheletrico.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione sui residui tirosina e serina/treonina, l'acetilazione e l'ubiquitinazione, che regolano la sua stabilità e l'interazione con i partner di segnalazione. La p85α è coinvolta anche nelle interazioni ospite-virus.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per la citometria a flusso fosfo-intracellulare, considerare l'uso di protocolli di fissazione/permeabilizzazione ottimizzati per la preservazione degli epitopi fosforilati. La pre-incubazione con inibitori delle fosfatasi può migliorare la stabilità del segnale.
• Validare la colorazione con appropriati controlli positivi e negativi (es. cellule umane non trattate vs stimolate con fattori di crescita) per confermare la specificità fosfo-specifica.
• Dato che questo anticorpo è coniugato direttamente ad , eseguire esperimenti di titolazione per determinare la concentrazione ottimale per il tipo di cellule e le condizioni sperimentali.
• Assicurarsi che il fluoroforo scelto sia compatibile con il pannello di citometria a flusso e la configurazione dello strumento.

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