Anticorpo monoclonale coniugato coniglio anti-umano RANKL/CD254 mAb - O14788

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RANKL/CD254

• Il membro 11 della superfamiglia dei ligandi del fattore di necrosi tumorale (TNFSF11), noto anche come RANKL, OPGL, ODF, TRANCE e CD254, è una proteina transmembrana di tipo II appartenente alla famiglia dei ligandi del TNF.
• Come regolatore chiave del metabolismo osseo, RANKL si lega a TNFRSF11A/RANK per promuovere la differenziazione e l'attivazione degli osteoclasti, mentre l'interazione con il recettore esca TNFRSF11B/OPG inibisce questo processo. Induce l'osteoclastogenesi attraverso oscillazioni del Ca²⁺ e trascrizione genica mediata da NFATC1.
• RANKL potrebbe svolgere un ruolo nel potenziato riassorbimento osseo nell'ipercalcemia umorale da malignità, evidenziando il suo coinvolgimento nella perdita ossea patologica. Riferimenti correlati: PMID:22664871
• Oltre che nell'osso, RANKL funziona nel sistema immunitario potenziando la proliferazione delle cellule T naive guidata dalle cellule dendritiche, suggerendo un ruolo nelle interazioni cellule T/dendritiche e nelle risposte immunitarie dipendenti dalle cellule T.
• A livello subcellulare, RANKL si trova sulla membrana cellulare con topologia transmembrana, nel citoplasma ed è anche secreto in una forma solubile (sRANKL) generata da splicing alternativo o proteolisi.
• L'espressione è più alta nei linfonodi periferici, con livelli inferiori in milza, leucociti del sangue periferico, midollo osseo, cuore, placenta, muscolo scheletrico, stomaco e tiroide.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, e la proteina è associata a processi di sviluppo, differenziazione cellulare e varianti di malattia legate all'osteopetrosi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per la citometria a flusso intracellulare (FC intra), ottimizzare i protocolli di permeabilizzazione e fissaggio per garantire l'accesso dell'anticorpo a RANKL citoplasmatico preservando l'integrità dell'epitopo.
• Includere controlli negativi appropriati, come un anticorpo isotipo-matching o cellule con espressione di TNFSF11 silenziata, per confermare la specificità della colorazione.
• Poiché RANKL può essere legato alla membrana o secreto, valutare l'espressione in linee cellulari o cellule primarie note per esprimere RANKL, come cellule T attivate o osteoblasti.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo nel proprio specifico sistema campione, poiché l'accessibilità dell'epitopo può variare con le condizioni di fissaggio e permeabilizzazione.

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