Anticorpo Monoclonale di Coniglio anti-Umano Siglec-8 per Citometria a Flusso - Q9NYZ4

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Siglec-8

• Siglec-8 è una lectina simile alle immunoglobuline legante l'acido sialico, nota anche come membro 2 della famiglia delle sialoadhesine (SAF-2). È codificata dal gene SIGLEC8 ed è un membro della sottofamiglia delle Siglec correlate a CD33.
• Funziona come una presunta molecola di adesione che media il legame dipendente dall'acido sialico alle cellule del sangue, riconoscendo preferenzialmente l'acido sialico legato α2,3 e legandosi anche all'acido sialico legato α2,6. Riferimenti correlati: PMID:10625619 PMID:10856141
• Riconosce epitopi che richiedono un acido N-acetilneuramminico terminale (acido sialico) e un galattoso-6-solfato sottostante, con una preferenza per i glicani sialil-Lewis X solfati in posizione 6 del galattosio. Riferimenti correlati: PMID:27357658
• Il sito di riconoscimento dell'acido sialico può essere mascherato da interazioni cis con acidi sialici sulla stessa superficie cellulare, modulando la sua attività di legame.
• Esprime specificamente sulla superficie di eosinofili, basofili e mastociti, indicando il suo ruolo nelle risposte allergiche e infiammatorie.
• Localizzata subcellularmente alla membrana, in linea con la sua funzione di recettore transmembrana.
• Contiene un peptide segnale N-terminale, domini extracellulari di tipo Ig (tipo V e tipo C2), un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica; classificata come una glicoproteina con ponti disolfuro.
• Esistono multiple isoforme proteiche dovute a splicing alternativo, con pesi molecolari riportati di 44kDa, 46kDa e 54kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che comprende gli amminoacidi 17–363, coprendo la regione extracellulare, il che probabilmente garantisce il riconoscimento della Siglec-8 nativa espressa in superficie.
• Questo anticorpo è validato per la citometria a flusso (FC); si consiglia di titolare da 0,1 a 1 μg per test per determinare la concentrazione ottimale di colorazione per la propria popolazione cellulare.
• Per la colorazione di sangue intero umano o PBMC, includere un passaggio di blocco dei recettori Fc e controlli isotipo appropriati per minimizzare il legame aspecifico.
• Verificare la specificità confrontando la colorazione su cellule primarie Siglec-8-positive (eosinofili, basofili) rispetto ai linfociti Siglec-8-negativi.
• A causa del potenziale mascheramento cis dell'epitopo, verificare, se necessario per il proprio saggio, che il trattamento delle cellule con sialidasi non alteri il legame dell'anticorpo.
• Utilizzare un gate per cellule vitali e, in caso di fissazione, assicurarsi che le condizioni di fissazione/permeabilizzazione non alterino l'epitopo riconosciuto dall'anticorpo.

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