Anticorpo monoclonale coniglio anti-Siglec-8 umano per citometria a flusso - Q9NYZ4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Siglec-8

• Siglec-8 (Lectina 8 simile all'immunoglobulina legante l'acido sialico), noto anche come SAF-2 (membro 2 della famiglia delle sialoadesine), è un recettore transmembrana appartenente alla famiglia delle Siglec, le lectine leganti l'acido sialico, codificato dal gene SIGLEC8 (GeneID: 27181).
• Funge da presunta molecola di adesione che media il legame dipendente dall'acido sialico con le cellule del sangue. Si lega preferenzialmente all'acido sialico legato in α-2,3 e, in misura minore, all'acido sialico legato in α-2,6. Il sito di legame può essere mascherato da interazioni cis con gli acidi sialici presenti sulla stessa superficie cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10625619 PMID:10856141
• Riconosce epitopi glicanici contenenti un acido N-acetilneuraminico (acido sialico) terminale e un galattosio 6-O-solfato sottostante, con una forte preferenza per le strutture sialil-Lewis X 6-O-solfate. Riferimenti correlati: PMID:27357658
• La proteina presenta più domini simili all'immunoglobulina, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica. Lo splicing alternativo genera isoforme con pesi molecolari previsti di 44, 46 e 54 kDa, coerenti con la forma glicosilata matura.
• Localizzato sulla membrana plasmatica, Siglec-8 è espresso specificamente sulle cellule del sangue, in particolare basofili, mastociti ed eosinofili, il che lo rende un marcatore chiave per queste linee cellulari.
• Le modificazioni post-traduzionali comprendono la N-glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, essenziali per la stabilità strutturale e il riconoscimento del ligando. La struttura tridimensionale è stata determinata sperimentalmente (PDB disponibile), e mette in evidenza l'architettura del dominio lectina.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre il dominio extracellulare legante l'acido sialico (aa 17–363), quindi questo anticorpo è probabilmente in grado di riconoscere conformazioni native: si consiglia di utilizzarlo principalmente per la colorazione di superficie in citometria a flusso.
• Validato per citometria a flusso (FC) con campioni umani; per altre applicazioni (ad esempio Western blot, IHC) si consiglia un'ottimizzazione interna che includa condizioni di recupero dell'antigene e di bloccaggio.
• A causa dell'espressione limitata su eosinofili, mastociti e basofili, includere controlli positivi appropriati (ad esempio eosinofili purificati o linee cellulari) e controlli isotipici per confermare la specificità.
• Titrare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale, poiché i livelli di espressione di Siglec-8 possono variare tra i diversi tipi cellulari.

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