Anticorpo Monoclonale Conigliato anti-T-bet/Tbx21 Umano per Citometria di Flusso Intracellulare - Q9UL17

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di T-bet/Tbx21

• T-bet (TBX21) è il fattore di trascrizione principale per l'impegno della linea cellulare Th1, che avvia lo sviluppo dei Th1 attivando i programmi genici specifici per questo sottotipo e reprimendo contemporaneamente i programmi genetici Th2 e Th17. Riferimenti correlati: PMID:10761931

• Attiva direttamente l'espressione dei geni IFNG e CXCR3 reclutando complessi di rimodellamento della cromatina, tra cui KDM6B e SWI/SNF contenente SMARCA4, che stabiliscono una topologia cromatinica permissiva. Riferimenti correlati: PMID:33296702

• T-bet recluta il complesso di super allungamento (SEC) contenente CDK9 e ciclina T1 sui super-enhancer, promuovendo l'allungamento trascrizionale dei geni associati a Th1. Riferimenti correlati: PMID:27292648

• Sopprime i destini alternativi delle cellule T helper: blocca la differenziazione Th17 inibendo l'attivazione di RORC mediata da RUNX1 e reprime le citochine Th2 (IL-4, IL-5, IL-13) downregolando GATA3 e NFATC2.

• T-bet protegge le cellule Th1 dall'amplificazione di risposte aberranti all'interferone di tipo I in ambienti ricchi di IFN-gamma, agendo come repressore dei fattori di trascrizione dell'IFN di tipo I e degli ISG.

• È necessario per il corretto sviluppo delle cellule natural killer (NK) e delle cellule T invarianti associate alle mucose (MAIT). Riferimenti correlati: PMID:33296702

• T-bet si localizza nel nucleo e subisce modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua attività.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per la colorazione intracellulare di questo target nucleare, assicurati di utilizzare un protocollo robusto di fissazione e permeabilizzazione ottimizzato per i fattori di trascrizione. Valuta di testare diversi tamponi di permeabilizzazione per bilanciare l'accessibilità dell'epitopo e la conservazione della morfologia cellulare.
• Titra l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tuo tipo cellulare specifico e le tue condizioni sperimentali; includi un controllo di isotipo appropriato e un controllo con fluorescenza zero (FMO) per valutare il segnale di fondo.
• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 322–535) di T-bet umano, ciò può facilitare la rilevazione sia della proteina full-length che di potenziali varianti di splicing, ma la reattività crociata con altri membri della famiglia T-box deve essere verificata nel tuo sistema di analisi.

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