Anticorpo Monoclonale Rabbit anti-TIM-3/HAVCR2 Umano per Citometria a Flusso - Q8TDQ0

Specifiche e Parametri Core del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di TIM-3/HAVCR2

• Identità proteica e isoforme: Il recettore cellulare 2 del virus dell'epatite A (HAVCR2), noto anche come proteina 3 contenente dominio immunoglobulina e mucina delle cellule T (TIM-3), è una glicoproteina transmembrana di tipo I appartenente alla famiglia TIM dei recettori immunomodulatori.
• Checkpoint immunitario inibitorio core: TIM-3 funziona principalmente come recettore co-inibitorio che attenua le risposte delle cellule T, promuovendo la tolleranza immunologica e sopprimendo le risposte auto e alloimmuni mediate da Th1. Riferimenti correlati: PMID:14556005
• Regolazione della segnalazione delle cellule T: Nelle cellule CD8+, TIM-3 inibisce le attività di NF-kB e NFAT indotte da TCR, riducendo la secrezione di IL-2, probabilmente attraverso l'associazione con LCK e il reclutamento di PTPRC alla sinapsi immunologica. Riferimenti correlati: PMID:24337741 PMID:26492563
• Interazioni con i ligandi: TIM-3 si lega alla galectina-9 (LGALS9) e alla fosfatidilserina (PtSer), mediando la soppressione immunitaria, l'apoptosi delle cellule Th1 e la fagocitosi delle cellule apoptotiche. Tuttavia, la rilevanza funzionale del legame con LGALS9 è stata oggetto di dibattito. Riferimenti correlati: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• Modulazione immunitaria innata: Espresso su macrofagi, cellule dendritiche e cellule NK, TIM-3 regola le risposte innate, tra cui l'attivazione dei macrofagi e la citotossicità delle cellule NK. Riferimenti correlati: PMID:11823861 PMID:22323453 PMID:22383801
• Modello di espressione tissutale: TIM-3 è espresso principalmente sulle cellule Th1, le cellule T regolatorie (Treg), le cellule dendritiche e le cellule natural killer (NK). La sua espressione è upregolata in infezioni croniche come HCV e HIV, contribuendo all'esaurimento delle cellule T.
• Localizzazione subcellulare e topologia: Localizzato sulla membrana cellulare e concentrato nelle giunzioni cellulari, presenta un dominio immunoglobulina extracellulare, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica con residui di tirosina conservati.
• Modifiche post-traduzionali: La proteina subisce glicosilazione N-linked, palmitoilazione e fosforilazione. I ponti disolfuro stabilizzano il dominio Ig, e l'ubiquitinazione può regolarne il ricambio.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 22–200) di TIM-3 umano, garantendo il riconoscimento del recettore nativo. Si consiglia di utilizzare la proteina TIM-3 ricombinante o le cellule trasfettate con TIM-3 come controlli positivi.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo da 0,1 a 1,0 µg per milione di cellule e includere controlli di isotipo appropriati. Validare la colorazione su cellule T umane attivate (es. PBMC stimolate con anti-CD3/CD28) dove TIM-3 è upregolato.
• Questo anticorpo coniugato semplifica la rilevazione diretta, riducendo al minimo il fondo non specifico derivante dai reagenti secondari. Utilizzarlo in pannelli multicolore con un'attenta compensazione, in particolare quando combinato con altri fluorofori a 488 nm.
• Confermare la vitalità delle cellule del substrato ed evitare protocolli di fissazione che mascherano l'epitopo; si consiglia la colorazione di cellule vive.

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