Anticorpo Monoclonale Coniglio anti-TNF-α Umano per Citometria a Flusso Intracellulare - P01375

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Tumor Necrosis Factor

• Il fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-α), noto anche come cachectina o TNFSF2, è una citochia chiave della superfamiglia TNF e esiste sia in forma transmembrana che solubile. La forma solubile deriva dalla scissione proteolitica del precursore legato alla membrana.
• TNF-α si lega ai suoi recettori TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, innescando vie di segnalazione che portano ad apoptosi, sopravvivenza cellulare, infiammazione e modulazione immunitaria. È un pirogeno potente, che causa febbre direttamente o tramite induzione di IL-1, ed è coinvolto nell'induzione della cachessia.
• Nell'artrite reumatoide, TNF-α altera la funzione delle cellule T regolatrici upregolando la protein fosfatasi 1 (PP1), che defosforila FOXP3 alla Serina-418, inattivando così FOXP3 e rendendo le cellule Treg funzionalmente difettose. Riferimenti correlati: PMID:23396208
• TNF-α agisce come mediatore della morte cellulare nelle risposte immunitarie antitumorali, esemplificato dal suo ruolo con neutrofili stimolati con BCG e mimetic DIABLO/SMAC nelle cellule del cancro della vescica. Riferimenti correlati: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Promuove l'angiogenesi indurre sinergicamente la produzione di VEGF con IL1B e IL6. Riferimenti correlati: PMID:12794819
• TNF-α induce insulino-resistenza negli adipociti inibendo la fosforilazione tirosinica di IRS1 indotta dall'insulina e l'assunzione di glucosio, in parte tramite la degradazione della proteina GKAP42, e promuove l'osteoclastogenesi, contribuendo al riassorbimento osseo.
• Subcellularmente, TNF-α è localizzato sulla membrana cellulare, nelle membrane intracellulari e viene secretato. La forma del dominio intracellulare TNF (ICD) può inoltre indurre la produzione di IL12 nelle cellule dendritiche.
• Le modifiche post-traduzionali includono la formazione di legami disolfuro, glicosilazione, miristoilazione e fosforilazione, che sono critiche per la sua stabilità e attività.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 77-233) corrisponde alla forma solubile matura di TNF-α, privo del dominio transmembrana N-terminale. Questo progetto può favorire la rilevazione sia delle forme precursori secretate che intracellulari.
• Il coniugato è ottimizzato per la citometria a flusso; per la colorazione intracellulare, si consiglia di utilizzare un protocollo di fissazione/permeabilizzazione validato per le citochine. Includere appropriati controlli isotipici e confermare la colorazione in campioni stimolati rispetto a non stimolati.
• Eseguire esperimenti di titolazione per determinare la concentrazione ottimale dell'anticorpo per la vostra specifica configurazione sperimentale, poiché gli indici di colorazione possono variare tra tipi cellulari e stati di attivazione.

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