Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-ULBP2 umano per FC - Q9BZM5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ULBP2

• ULBP2 (UL16-binding protein 2), conosciuto anche come ALCAN-alfa, N2DL2, NKG2DL2 o RAET1H, è una proteina di membrana ancorata a GPI e un membro della famiglia dei ligandi di NKG2D RAET1.
• Funge da ligando per il recettore KLRK1/NKG2D, un recettore attivatorio espresso sulle cellule natural killer (NK) e su alcuni sottogruppi di cellule T, scatenando risposte immunitarie citotossiche.
• Dopo il legame con NKG2D, ULBP2 media la citotossicità mediata dalle cellule NK contro le cellule bersaglio, svolgendo un ruolo cruciale nell'immunosorveglianza tumorale.
• ULBP2 è localizzata sulla membrana cellulare tramite un'ancora GPI, ma esiste anche una forma secreta; è inoltre rilevabile nel reticolo endoplasmatico.
• La sua espressione è altamente ristretta ai tessuti: si trova in varie linee cellulari tumorali e tessuti fetali, ma è assente nei tessuti adulti normali, sottolineando il suo potenziale come antigene tumorale.
• La proteina presenta un peptide segnale, siti di N-glicosilazione e ponti disolfuro, importanti per il suo corretto ripiegamento e funzione.
• È noto che ULBP2 interagisce con proteine virali di evasione immunitaria (es. UL16 del citomegalovirus umano), da cui deriva la sua identificazione originale come proteina legante UL16.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 26–217) dell'ULBP2 umano, comprendendo la regione di legame per NKG2D; questo design supporta il rilevamento dell'ULBP2 esposta sulla superficie in citometria a flusso su cellule vive.
• Per l'analisi citofluorimetrica, colorare cellule vitali senza permeabilizzazione per valutare l'ULBP2 localizzata sulla membrana, poiché la permeabilizzazione potrebbe portare alla colorazione della frazione associata al reticolo endoplasmatico.
• Includere controlli positivi appropriati (es. linee cellulari tumorali che esprimono ULBP2) e controlli negativi (cellule di tessuto normale) per validare la specificità, in linea con il profilo di espressione ristretto della proteina.
• Effettuare una titolazione dell'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio sistema sperimentale e assicurare una corretta compensazione quando si utilizzano più fluorofori.
• A causa del possibile rilascio o secrezione di ULBP2, scegliere attentamente le condizioni di colorazione (tempo, temperatura) per minimizzare la perdita dell'antigene di superficie.

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