Anticorpo monoclonale coniglio anti-Umano/Scimmia CD14 per citometria a flusso - P08571

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD14

• Il CD14, designato anche antigene My23, è una glicoproteina ancorata al glicosilfosfatidilinositolo (GPI) e un membro della famiglia delle ripetizioni ricche di leucina (LRR).
• Funziona come corecettore per il lipopolisaccaride batterico (LPS). In concerto con LBP, il CD14 cattura il LPS monomerico e lo trasferisce al complesso LY96/TLR4, innescando la segnalazione immunitaria innata. Riferimenti correlati: PMID:1698311 PMID:23264655
• La segnalazione a valle richiede gli adattatori MyD88, TIRAP e TRAF6, portando infine all'attivazione di NF-kappa-B e alla secrezione di citochine proinfiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:8612135
• Il CD14 funziona anche come corecettore per gli eterodimeri TLR2:TLR6 e TLR2:TLR1, riconoscendo rispettivamente lipopeptidi diacilati e triacilati. Questi cluster di recettori segnalano dalla superficie cellulare prima di essere internalizzati nell'apparato di Golgi tramite una via dipendente dai lipid rafts. Riferimenti correlati: PMID:16880211
• Inoltre, il CD14 si lega alle LDL elettro-negative (LDL(-)) e media il rilascio di citochine indotto da questa lipoproteina modificata. Riferimenti correlati: PMID:23880187
• La proteina è situata prevalentemente sulla membrana plasmatica, arricchita nei raft di membrana, e traffica verso il Golgi; una forma solubile viene anche rilasciata nell'ambiente extracellulare.
• Il CD14 è altamente espresso sulla superficie dei monociti e della maggior parte dei macrofagi tissutali, con livelli più bassi rilevabili sui granulociti. Riferimenti correlati: PMID:1698311

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre il dominio extracellulare (aa 20-352), mirando a una regione critica per il legame del ligando; verificare la reattività con il CD14 legato alla membrana e solubile nel sistema di campione pertinente.
• Come coniugato , utilizzare impostazioni appropriate di laser e filtro per la citometria a flusso (es. eccitazione a 488 nm, emissione 500–550 nm). Titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale-rumore sulle popolazioni di monociti/macrofagi.
• Confermare l'espressione nei controlli positivi come PBMC umani o monociti isolati; la reattività crociata con cynomolgus consente studi traslazionali su primati non umani.
• Per la colorazione intracellulare o il rilevamento del pool localizzato nel Golgi, considerare i passaggi di permeabilizzazione dopo l'etichettatura di superficie.

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