Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD4 umano/macaco per FC - P01730

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CD4

• Il CD4 è una glicoproteina transmembrana di tipo I da 51 kDa appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, nota anche come T4 o Leu-3.
• Funziona come corecettore per le molecole MHC di classe II, legandosi simultaneamente al recettore delle cellule T (TCR) e all'MHC di classe II sulle cellule presentanti l'antigene, con conseguente reclutamento di LCK e attivazione della segnalazione a valle.
• Il CD4 è essenziale per lo sviluppo delle cellule T helper nel timo e promuove la differenziazione da monociti a macrofagi in modo indipendente da TCR/LCK.
• Fortemente espresso sulle cellule T helper, il CD4 è presente anche su macrofagi, cellule dendritiche e cellule NK, mediando adesione e migrazione.
• Il CD4 è il principale recettore per HIV-1 e facilita l'ingresso virale nelle cellule ospiti (PubMed:12089508, PubMed:16331979, PubMed:2214026). Riferimenti correlati: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026
• La proteina Vpu di HIV-1 riduce l'espressione del CD4 per eludere le risposte immunitarie (PubMed:17346169). Riferimenti correlati: PMID:17346169
• Il CD4 agisce anche come recettore per l'herpesvirus umano 7 (HHV-7) (PubMed:7909607). Riferimenti correlati: PMID:7909607
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-linked, formazione di ponti disolfuro, palmitoilazione e fosforilazione.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo riconosce il dominio extracellulare del CD4, rendendolo adatto alla citometria a flusso su cellule vive senza permeabilizzazione.
• Il fluoroforo viene eccitato dal laser a 488 nm ed emette nel canale verde (in genere con il set di filtri FITC/GFP); verificare la compatibilità con la configurazione del proprio citometro.
• Per ottenere una colorazione ottimale, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione appropriata per il tipo cellulare e le condizioni sperimentali specifiche.
• Utilizzare controlli isotipici appropriati e controlli fluorescence-minus-one (FMO) per definire le strategie di gating e valutare la colorazione aspecifica.
• L'espressione del CD4 varia tra i sottogruppi di cellule T e nei diversi stati di attivazione; validare l'anticorpo nel proprio sistema utilizzando popolazioni cellulari positive e negative ben caratterizzate.
• Poiché il CD4 è il recettore dell'HIV, evitare di utilizzare linee cellulari o cellule primarie portatrici di HIV, che potrebbero interferire con il legame dell'anticorpo o ridurre l'espressione del CD4.
• Se è necessaria la colorazione intracellulare, testare le prestazioni dell'anticorpo dopo fissazione e permeabilizzazione, poiché queste fasi possono influire sul riconoscimento dell'epitopo.
• È stato riportato che l'anticorpo presenta reattività crociata con il CD4 del macaco cinomolgo; per altre specie, eseguire un esperimento di validazione.

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