Anticorpo monoclonale coniugato Rabbit anti-Umano/Scimmia CD4 per citometria a flusso - P01730

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD4

• CD4 è una glicoproteina transmembrana di tipo I di 51 kDa e membro della superfamiglia delle immunoglobuline, contenente quattro domini extracellulari simili a Ig, una singola elica transmembrana e una coda citoplasmatica che media la trasduzione del segnale.
• Come co-recettore per le molecole MHC di classe II, CD4 si lega simultaneamente al recettore delle cellule T (TCR) ai complessi peptide-MHC di classe II sulle cellule che presentano l'antigene, reclutando la tirosin-chinasi LCK al complesso TCR–CD3 e avviando la segnalazione a valle necessaria per l'attivazione, la proliferazione e la differenziazione delle cellule T helper.
• Altamente espresso sulle cellule T helper, CD4 è presente anche su altre cellule immunitarie tra cui macrofagi, cellule dendritiche e cellule natural killer, dove contribuisce alla differenziazione, all'espressione di citochine e alla migrazione cellulare.
• CD4 funge da recettore primario per l'HIV-1, consentendo l'ingresso virale nelle cellule ospiti (PubMed:12089508, PubMed:16331979, PubMed:2214026). Riferimenti correlati: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026
• La proteina Vpu dell'HIV-1 mira a CD4 per la degradazione, regolandone negativamente l'espressione superficiale per promuovere la patogenesi virale (PubMed:17346169). Riferimenti correlati: PMID:17346169
• Inoltre, CD4 funziona come recettore per l'Herpesvirus Umano 7 (HHV-7) (PubMed:7909607). Riferimenti correlati: PMID:7909607
• Le modificazioni post-traduzionali di CD4 includono glicosilazione N-linked, legami disolfuro intercatena, palmitoilazione della coda citoplasmatica e fosforilazione, che ne modulano la stabilità, l'associazione alla membrana e la capacità di segnalazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Eseguire una titolazione dell'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il vostro esperimento di citometria a flusso; un punto di partenza tipico è 0,1–1 µg per 1×10^6 cellule.
• Includere controlli isotipo appropriati per valutare il legame aspecifico e stabilire le soglie di gating.
• Evitare una fissazione eccessiva delle cellule con paraformaldeide, poiché potrebbe alterare l'epitopo; se necessaria, utilizzare PFA fresco al 2% per 15 minuti a temperatura ambiente.
• Assicurare una sospensione a singola cellula e filtrare i campioni attraverso un setaccio cellulare da 70 µm prima dell'acquisizione per prevenire ostruzioni.
• Convalidare la colorazione in campioni biologici rilevanti (ad es. PBMC umani, linfociti di scimmia cynomolgus o rhesus) per confermare i modelli di espressione attesi.

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