Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-CD45 Umano/Scimmia per Citometria a Flusso - P08575

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD45

• La tirosin-proteina fosfatasi C di tipo recettore (CD45), codificata dal gene PTPRC, è anche nota come antigene comune leucocitario (L-CA) e T200. Esistono molteplici isoforme dovute a splicing alternativo.
• Essenziale per l'attivazione dei linfociti T attraverso il recettore dell'antigene; il primo dominio PTPasi ha attività enzimatica, mentre il secondo modula la specificità del substrato. Durante l'attivazione dei linfociti T, CD45 recluta e defosforila SKAP1 e FYN, e modula l'attività di LYN. Riferimenti correlati: PMID:35767951
• Agisce come recettore per la proteina UL11 del citomegalovirus umano, mediando il legame del virus ai linfociti T e compromettendo la proliferazione e la segnalazione dei linfociti T.
• Si localizza sulla membrana cellulare, nei raft di membrana e nella sinapsi immunologica, posizionandosi nei siti di riconoscimento dell'antigene e trasduzione del segnale.
• Le isoforme 1–3, 5 e 7 sono rilevate nei timociti, mentre le isoforme 4, 6 e 8 non lo sono, indicando modelli di espressione tessuto-specifici.
• Modificato post-traduzionalmente mediante glicosilazione e fosforilazione; classificato sotto le parole chiave idrolasi, fosfatasi proteica, glicoproteina e interazione ospite-virus.
• Appartiene alla famiglia delle proteina-tirosina fosfatasi, sottoclasse recettoriale 1/6, e agisce come hub di segnalazione chiave nelle cellule immunitarie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 26–577 del CD45 umano, che includono la regione extracellulare; pertanto, si prevede che l'anticorpo riconosca epitopi extracellulari nativi.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tipo cellulare specifico e le impostazioni dello strumento; utilizzare un controllo isotipo appropriato.
• Validare la colorazione su cellule note CD45-positive (es. PBMC umane, Jurkat) e su cellule negative (es. eritrociti).
• Poiché il CD45 è altamente espresso sui leucociti, considerare il blocco dei recettori Fc per minimizzare il legame aspecifico.
• Il coniugato è compatibile con i comuni filtri di emissione (es. 614/20 nm); assicurare una corretta compensazione nei pannelli multicolore.
• La fissazione e la permeabilizzazione possono alterare il riconoscimento dell'epitopo del CD45; testare se la colorazione di superficie è sufficiente per il proprio protocollo.
• Conservare l'anticorpo non diluito a 2–8°C, protetto dalla luce, ed evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento per mantenere l'integrità del coniugato.

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