Coniglio anti-Umano/Scimmia CD8a Anticorpo Monoclonale per Citometria a Flusso - P01732

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD8a

• CD8A è la glicoproteina di superficie delle cellule T catena alfa del CD8, nota anche come T8/Leu-2, codificata dal gene CD8A nell'uomo. Lo splicing alternativo produce multiple isoforme.
• La sua funzione principale è quella di corecettore glicoproteico di membrana integrale per le molecole di classe I del MHC. Nelle cellule T, interagisce simultaneamente con il recettore delle cellule T (TCR) e il complesso MHC classe I:peptide, reclutando la chinasi Src LCK al complesso TCR-CD3 per avviare vie di segnalazione intracellulare che portano all'attivazione dei linfociti T citotossici (CTL), alla produzione di linfochine e all'adesione.
• I omodimeri CD8A sulle cellule natural killer (NK) forniscono un meccanismo di sopravvivenza, consentendo la coniugazione e la lisi di più cellule bersaglio, e promuovono la differenziazione dei linfociti attivati in cellule T di memoria CD8.
• CD8A appartiene alla superfamiglia delle immunoglobuline e tipicamente forma eterodimeri legati da ponti disolfuro con CD8B (catena beta del CD8) sulle cellule T derivate dal timo; gli omodimeri sono anche espressi su sottoinsiemi di cellule immunitarie.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare e la forma secreta. È una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo con un peptide segnale, un dominio extracellulare simile alle immunoglobuline, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica.
• Specificità tissutale: Espressa sulle cellule T citotossiche, un sottoinsieme di cellule NK, cellule T di memoria, linfociti intraepiteliali, monociti, cellule dendritiche e sulle cellule dendritiche plasmacitoidi dopo stimolazione con virus dell'herpes simplex-1.
• Modificazioni post-traduzionali e parole chiave: Glicosilata, palmitoilata e contiene legami disolfuro. Annotata come glicoproteina, lipoproteina, legame disolfuro; coinvolta nell'immunità adattativa, splicing alternativo; collegata a varianti della malattia.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che copre la regione extracellulare (aa 22-182). Questa progettazione probabilmente produce anticorpi che riconoscono epitopi di superficie sulle cellule viventi senza permeabilizzazione, rendendolo adatto per la colorazione diretta in citometria a flusso (FC).
• Per la FC, titolare il coniugato per determinare la diluizione di lavoro ottimale. Includere appropriati anticorpi di controllo isotipo e blocco dei recettori Fc. Verificare la specificità utilizzando linee cellulari CD8A-positive note (es. Jurkat) o cellule mononucleate del sangue periferico.
• La reattività incrociata è riportata con la scimmia cynomolgus. Se si utilizzano campioni di cynomolgus, validare l'anticorpo nel proprio sistema di saggio con controlli appropriati.
• Sono riportati pesi proteici multipli (21, 25, 30 kDa); questi probabilmente riflettono forme glicosilate differenzialmente o varianti isoforma. Se si esegue un western blot come passo confermativo, prevedere potenziali bande multiple.
• Per pannelli a colori multipli in citometria a flusso, confermare la sovrapposizione spettrale minima con altri fluorofori e includere controlli di compensazione. La natura monoclonale di coniglio e la coniugazione diretta facilitano risultati riproducibili.

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