Anticorpo monoclonale di coniglio anti-IgD umano/di scimmia per citometria a flusso - P01880

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'IgD

• L'IgD è la regione costante delle catene pesanti delle immunoglobuline e costituisce l'isotipo principale del recettore antigenico sulla maggior parte delle cellule B periferiche mature, dove viene coespressa con l'IgM. La forma legata alla membrana (mIgD) attiva le cellule B attraverso la fosforilazione di CD79A/CD79B da parte delle tirosin-chinasi della famiglia Src. Riferimenti correlati: PMID:20176268, PMID:22158414

• I domini variabili dell'IgD, assemblati mediante ricombinazione V-(D)-J e ipermutazione somatica, si associano ai domini variabili delle catene leggere per formare due siti di legame dell'antigene, consentendo la maturazione dell'affinità in seguito all'esposizione all'antigene. Riferimenti correlati: PMID:17576170, PMID:20176268

• L'IgD solubile (sIgD) viene secreta nel siero a concentrazioni inferiori a quelle di IgG, IgA e IgM, ma superiori a quelle di IgE; la sua produzione viene interrotta in seguito al legame dell'antigene con il recettore delle cellule B.

• L'IgD è un potente immunomodulatore in grado di indurre il rilascio di citochine (TNF, IL1B, IL1RN, IL6, IL10, LIF) da parte delle cellule mononucleate del sangue periferico, con i monociti identificati come principali cellule respons responsive in vitro. Riferimenti correlati: PMID:10702483, PMID:11282392, PMID:8774350

• A livello subcellulare, l'IgD esiste sia come recettore legato alla membrana sulle cellule B sia come glicoproteina secreta, in linea con i suoi duplice ruoli nel riconoscimento dell'antigene e nelle funzioni effettrici umorali.

• La proteina è classificata con le parole chiave dominio delle immunoglobuline, legame disolfuro, glicoproteina ed elica transmembrana, e il suo record UniProt indica uno splicing alternativo.

• Il peso molecolare previsto dell'isoforma canonica è di circa 47,5 kDa, in accordo con la banda osservata a 47 kDa riportata per questo anticorpo.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro una proteina di fusione ricombinante comprendente gli amminoacidi 99-384 dell'IgD umano e diretta contro la regione costante. È validato per la citometria a flusso; assicurarsi che i protocolli di permeabilizzazione cellulare e colorazione siano ottimizzati per il rilevamento dell'IgD legata alla membrana.
• Per gli studi che utilizzano il macaco cinomolgo come organismo modello, la reattività crociata è stata confermata; includere sempre controlli isotipici e compensazioni a singolo colore nella progettazione di pannelli FC multicolore.
• Valutare l'abbinamento di questo anticorpo anti-IgD marcato con anticorpi anti-IgM e marcatori della linea B (ad es. CD19, CD20) per caratterizzare le sottopopolazioni delle cellule B e gli stati di attivazione.
• L'immunogeno corrisponde al dominio costante; pertanto, l'anticorpo può riconoscere sia le forme legate alla membrana sia quelle solubili. Validare la specificità nel proprio sistema campione utilizzando lisati di cellule B o surnatanti, a seconda dei casi.

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