Coniglio anti-Umano/Scimmia IgM mAb - P01871-1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'IgM

• L'isoforma 1 della regione costante pesante delle immunoglobuline mu (IGHM) costituisce la regione Fc dell'IgM secreta (sIgM). Include segmenti C-terminali critici per la polimerizzazione e le interazioni effettori.
• La sIgM multimerizza prevalentemente in pentameri e occasionalmente in esameri, consentendo un legame all'antigene di alta avidità. Riferimenti correlati: PMID:32029689, PMID:37095205
• La sIgM naturale è polireattiva e riconosce strutture conservate derivate dal sé e dai patogeni, mentre la sIgM immunitaria è specifica per l'antigene e indotta dall'esposizione ai patogeni; entrambe sono essenziali per un'immunità umorale efficiente.
• La regione Fc media le funzioni effettori incluso il legame di alta affinità al recettore Fc FCMR sulle cellule linfoidi, promuovendo risposte IgG neutralizzanti e l'autotolleranza, e reclutando il complemento C1q per attivare la via classica. Riferimenti correlati: PMID:12847249, PMID:19006321, PMID:28230186
• La sIgM contribuisce alla clearance delle cellule apoptotiche collaborando con C1q e la lecitina legante il mannosio per potenziare la fagocitosi dei macrofagi. Riferimenti correlati: PMID:12847249, PMID:19006321, PMID:28230186
• Nell'immunità mucosale, la sIgM viene transcitata attraverso l'epitelio tramite PIGR e secreta con il componente secretorio per scansionare i patogeni; i complessi IgM-antigene subiscono retrotranscitosi mediata da FCMR attraverso le cellule M per la presentazione dell'antigene. Riferimenti correlati: PMID:32029689
• Localizzazione subcellulare: Secreta; funziona extracellularmente nel plasma, sulle superfici mucose e nei fluidi interstiziali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 218–453 all'interno della regione costante dell'IgM umana, suggerendo che l'anticorpo riconosce un epitopo lineare conservato nella porzione Fc; confermare la reattività sia sull'IgM secreta che su quella legata alla membrana nel proprio sistema.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC e IF-P), la permeabilizzazione potrebbe non essere necessaria per rilevare l'IgM espressa sulla superficie, ma la fissazione e la permeabilizzazione possono essere utilizzate per la colorazione intracellulare se necessario.
• In citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo di cellule e utilizzare controlli di isotipo appropriati e blocco Fc per minimizzare il legame aspecifico.
• Assicurarsi che la strumentazione sia attrezzata per rilevare (massimi di eccitazione/emissione ~490/515 nm) e convalidare il modello di colorazione con linee cellulari o sezioni tissutali note positive e negative per l'IgM.
• È stata riportata reattività crociata con l'IgM di cinomolgo; verificare le prestazioni nelle proprie condizioni sperimentali specifiche e nei tipi di cellule/tessuti.

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