Anticorpo monoclonale coniglio anti-Ki67 umano/scimmia mAb - P46013

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Ki67

• La proteina marcatore di proliferazione Ki-67 (antigene KI-67) è una proteina nucleare codificata dal gene MKI67; è ampiamente utilizzata come marcatore per la proliferazione cellulare.
• Durante la mitosi precoce, Ki-67 si rilocalizza dai nucleoli alla superficie dei cromosomi, dove forma strutture estese simili a pennelli che separano fisicamente i cromosomi, impedendone il collasso in un'unica massa di cromatina attraverso repulsione sterica ed elettrostatica. Riferimenti correlati: PMID:27362226
• Man mano che la mitosi progredisce verso l'anafase, la defosforilazione di Ki-67 innesca un cambio funzionale: il pennello collassa e Ki-67 promuove l'aggregazione dei cromosomi e l'esclusione delle particelle citoplasmatiche dal nucleo in formazione. Riferimenti correlati: PMID:32879492, PMID:39153474
• Ki-67 può subire una separazione di fase liquido-liquido sulle superfici dei cromosomi, mediata dal legame con RNA ribosomiali prematuri, che promuove la coalescenza dei cromosomi vicini durante la mitosi tardiva. Riferimenti correlati: PMID:28935370, PMID:39153474
• La proteina mostra attività di legame al DNA con una preferenza per il DNA superavvolto e ricco di AT. Riferimenti correlati: PMID:10878551
• La localizzazione subcellulare è dinamica: si trova principalmente nel nucleolo durante l'interfase ed è associata ai cromosomi per tutta la mitosi.
• Ki-67 è soggetta a molteplici modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, che ne regolano le funzioni mitotiche.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico della regione C-terminale (aa 2271–2370); confermare che l'epitopo sia accessibile nel vostro sistema di rilevamento, specialmente nelle condizioni di fissazione/permeabilizzazione utilizzate per la citometria a flusso intracellulare.
• Per la colorazione intracellulare, ottimizzare i passaggi di fissazione e permeabilizzazione secondo protocolli standard per garantire un'adeguata penetrazione dell'anticorpo e il rilevamento dell'antigene.
• L'espressione di Ki-67 è dipendente dal ciclo cellulare; includere controlli appropriati (ad es. cellule in carenza di siero o non proliferanti) per convalidare la specificità nel vostro modello sperimentale.
• Il peso molecolare previsto è ~319–359 kDa; confermare la dimensione della banda mediante elettroforesi su gel denaturante se utilizzata, e notare che possono comparire anche frammenti proteolitici.

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