Anticorpo monoclonale Rabbit anti-Uomo/Scimmia Ki67 per Citometria a Flusso - P46013

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Ki67

• Ki67 è una proteina nucleare ampiamente utilizzata come marcatore di proliferazione, con due isoforme di circa 319 kDa e 359 kDa dovute allo splicing alternativo.
• Durante la mitosi precoce, Ki67 si rilocalizza dai nucleoli alla superficie dei cromosomi, formando una struttura simile a una spazzola che previene l'aggregazione cromosomica tramite repulsione sterica ed elettrostatica, garantendo la motilità indipendente dei cromosomi. Riferimenti correlati: PMID:27362226
• All'anafase, la defosforilazione innesca un cambio funzionale: Ki67 collassa in una fase condensata che attira i cromosomi, facilitando la riforma dell'involucro nucleare e l'esclusione delle particelle citoplasmatiche. Riferimenti correlati: PMID:32879492 PMID:39153474
• Ki67 lega gli RNA ribosomali prematuri durante l'anafase, promuovendo la separazione di fase liquido-liquido sulla superficie dei cromosomi, un processo critico per l'aggregazione cromosomica. Riferimenti correlati: PMID:28935370 PMID:39153474
• La proteina lega anche il DNA con una preferenza per le sequenze superavvolte e ricche di AT, sebbene il suo ruolo diretto nell'organizzazione della cromatina rimanga poco chiaro. Riferimenti correlati: PMID:10878551
• Localizzazione subcellulare: Ki67 si trova prevalentemente nel nucleolo durante l'interfase, si associa ai cromosomi in condensazione nella mitosi e riveste l'intera superficie cromosomica.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, che regolano le sue funzioni mitotiche e la sua stabilità.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 2271-2370 di Ki67 umano, localizzato nella regione C-terminale. Assicurarsi che l'epitopo bersaglio sia accessibile nelle condizioni di fissazione e permeabilizzazione previste.
• Per la citometria a flusso intracellulare (FC intra), utilizzare tamponi di permeabilizzazione compatibili con antigeni nucleari. Includere controlli di isotipo appropriati e validare la colorazione in una linea cellulare proliferante nota (es. HeLa, Jurkat) rispetto a un controllo non proliferante.
• La reattività crociata con la scimmia cinocefalo è confermata; verificare nel vostro sistema sperimentale specifico se lavorate con altre specie.
• Il fluoroforo coniugato è un sostituto di Pacific Blue/eFluor 450; verificare la compatibilità con lo strumento ed evitare l'esposizione prolungata alla luce.

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