Anticorpo monoclonale coniglio anti-Megalin/LRP2 per IF-P e FC (intracellulare) - P98164

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Megalin/LRP2

• Megalin (LRP2) è una glicoproteina transmembrana di tipo I di ~521 kDa, appartenente alla famiglia dei recettori delle lipoproteine a bassa densità, caratterizzata da multipli ripetuti di legame al ligando, domini simili all'EGF e una breve coda citoplasmatica.
• Funziona come recettore endocitico multiligando, mediando l'internalizzazione e la degradazione lisosomiale di diversi ligandi, tra cui lipoproteine, complessi vitamina-trasportatore, ormoni, enzimi e farmaci, spesso in collaborazione con la cubilina (CUBN).
• Nel rene, megalin è fondamentale per il riassorbimento tubulare delle proteine filtrate; media l'assorbimento di metalli pesanti legati alla metallotioneina (es. cadmio, mercurio), della proteina antiapoptotica survivina/BIRC5, dei complessi vitamina D3/GC-DBP, della mioglobina e delle metalloproteine della matrice, preservando così la funzionalità renale. Riferimenti bibliografici: PMID:15126248, PMID:23825075
• Nel sistema nervoso centrale, megalin trasporta la leptina attraverso la barriera ematoencefalica, partecipa alla clearance e alla transcitosi di Sonic Hedgehog (SHH) e facilita l'assorbimento di folato, essenziale per la chiusura del tubo neurale; meda inoltre la clearance dell'beta-amiloide e supporta la neurogenesi modulando la segnalazione BMP.
• Megalin è localizzata principalmente sulla membrana plasmatica apicale degli epitoli assorbenti polarizzati, come le cellule del tubulo prossimale renale, e subisce endocitosi mediata da clatrina verso gli endosomi.
• L'espressione tissutale è particolarmente evidente nella placenta (citiotrofoblasti del primo e terzo trimestre) e nei tubuli prossimali renali, come confermato dalle analisi a livello proteico. Riferimenti bibliografici: PMID:27798286
• Ulteriori ruoli fisiologici includono l'assorbimento da parte dei tessuti riproduttivi degli androgeni/estrogeni legati alla globulina legante gli ormoni sessuali (SHBG), il mantenimento della funzione uditiva e lo sviluppo cardiaco embrionario.
• La proteina è soggetta a legame con il calcio, fosforilazione e estesa glicosilazione, e le mutazioni in LRP2 sono associate alla sindrome di Donnai-Barrow e alla sordità.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre la regione citoplasmatica C-terminale (aa 4446–4655), che può consentire la rilevazione della forma full-length e di alcune forme processate di LRP2 sia in condizioni denaturate che native.
• Per l'immunofluorescenza su tessuti inclusi in paraffina (IF-P), si consiglia un passaggio di recupero dell'antigene indotto dal calore con tampone citrato a pH 6.0 per un'esposizione ottimale dell'epitopo.
• Per la citometria a flusso intracellulare (FC), fissazione e permeabilizzazione sono obbligatorie; si raccomandano titolazioni pilota (es. 0,5–5 µg/mL) nel tipo cellulare di interesse per determinare la concentrazione di colorazione ottimale.
• Sebbene convalidato per IF-P e FC, questo anticorpo monoclonale può funzionare anche in altre applicazioni; si consiglia una verifica indipendente, soprattutto data la grande dimensione e la struttura complessa di megalin.
• La reattività crociata con megalin di topo e ratto suggerisce sequenze epitopiche conservate; tuttavia, gli utenti devono confermare la reattività nel loro specifico sistema tissutale o cellulare.

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