Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD10 di topo per FC - Q61391

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CD10 (neprilisina)

• Il CD10, noto anche come neprilisina, atriopeptidasi, encefalinasi, endopeptidasi neutra 24.11 (NEP) o elastasi dei fibroblasti cutanei (SFE), è una metalloproteasi di membrana contenente zinco, codificata dal gene Mme.
• Presenta una specificità simile a quella della termolisina e scinde preferenzialmente polipeptidi fino a 30 amminoacidi, svolgendo un ruolo chiave nell'inattivazione di diversi peptidi di segnalazione.
• La neprilisina è essenziale nella degradazione di peptidi oppioidi come le met- e le leu-encefaline, mediante la scissione del legame Gly-Phe, modulando così le vie del dolore e dell'analgesia.
• Scinde peptidi vasoattivi tra cui bradichinina, sostanza P e neurotensina, contribuendo alla regolazione dell'infiammazione e del tono vascolare.
• L'enzima può processare la cascata peptidica dell'angiotensina, scindendo angiotensina-1, angiotensina-2 e angiotensina 1-9, implicandolo nel controllo della pressione sanguigna.
• La neprilisina degrada il fattore natriuretico atriale (ANF), un ormone cardiaco coinvolto nell'omeostasi del sodio e nella funzione cardiovascolare.
• In seguito all'esposizione ai raggi UV, la neprilisina mostra attività elastasica nei confronti delle fibre preelastiche ed elastiche della pelle, suggerendo un ruolo nel fotoinvecchiamento e nel rimodellamento della matrice extracellulare. Riferimenti correlati: PMID:20876573
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare come proteina integrale di membrana di tipo II, ancorando il suo sito attivo alla superficie extracellulare per un'idrolisi efficiente dei peptidi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una proteina di fusione ricombinante che comprende gli amminoacidi 52-750 del CD10 di topo, includendo l'ampio dominio catalitico extracellulare. Questo design probabilmente garantisce il riconoscimento delle forme native e denaturate del bersaglio.
• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio direttamente coniugato ad , è ottimizzato per la citometria a flusso con un background minimo. Si raccomandano esperimenti di titolazione (ad es. 0,1–1 µg per milione di cellule) per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il tipo cellulare e le condizioni di colorazione specifici.
• Includere controlli appropriati nei saggi di citometria a flusso: cellule non colorate, controllo isotipico coniugato allo stesso fluoroforo e controlli fluorescence-minus-one (FMO) se si utilizzano pannelli multicolore.
• Poiché il CD10 è un antigene della superficie cellulare, per la maggior parte delle applicazioni è generalmente sufficiente la colorazione di cellule vive senza permeabilizzazione. Tuttavia, se è necessaria una colorazione intracellulare, verificare la compatibilità dei tamponi di fissazione/permeabilizzazione con la reattività dell'anticorpo.
• Per ottenere prestazioni ottimali, proteggere l'anticorpo dall'esposizione prolungata alla luce per mantenere la stabilità del fluoroforo ed evitare cicli di congelamento/scongelamento.

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