Anticorpo monoclonale coniugato con coniglio anti-topo CD117/c-Kit per citometria a flusso - P05532

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD117/c-Kit

• Il recettore del fattore di crescita per mastocellule/cellule staminali Kit, noto anche come proto-oncogene c-Kit o tirosin-chinasi Kit, è codificato dal gene Kit (Sl) nel topo.
• Agisce come recettore di superficie cellulare per la citochina KITLG/SCF, svolgendo ruoli essenziali nella sopravvivenza cellulare, proliferazione, ematopoiesi, mantenimento delle cellule staminali, gametogenesi, sviluppo e funzione dei mastociti e melanogenesi.
• Dopo il legame con KITLG/SCF, attiva molteplici vie di segnalazione tra cui PI3K-AKT, RAS-MAPK e JAK-STAT; fosforila PIK3R1, PLCG1, SH2B2, CBL e recluta GRB2 portando all'attivazione della cascata RAS/RAF/MAPK.
• Appartiene alla famiglia delle tirosin-chinasi recettoriali di tipo III, condividendo caratteristiche strutturali con PDGFR e CSF1R, caratterizzate da domini simili alle immunoglobuline e un dominio tirosin-chinasico separato.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare e il citoplasma; l'internalizzazione rapida e la degradazione dopo l'attivazione servono a modulare l'intensità e la durata della segnalazione.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di legami disolfuro e fosforilazione; lo splicing alternativo genera multiple isoforme con distribuzioni tissutali distinte.
• Le isoforme 1 e 2 sono rilevate nelle cellule del midollo osseo, spermatogoni e spermatociti; l'isoforma 3 si trova in spermatidi rotondi, spermatidi allungati, spermatozoi e cellule staminali ematopoietiche del midollo osseo.
• Ampiamente espresso nel fegato fetale e nel midollo osseo, con espressione isoforma-specifica nelle cellule germinali e nelle cellule staminali ematopoietiche.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre il dominio extracellulare (aa 25-523) del CD117/c-Kit di topo, che comprende la regione di legame del ligando; l'anticorpo può riconoscere in modo efficiente il recettore nativo su cellule vive.
• Validato per citometria a flusso; adatto per analizzare l'espressione di CD117/c-Kit su cellule staminali ematopoietiche di topo, mastociti, cellule germinali o altre popolazioni che esprimono Kit.
• Per risultati ottimali in citometria a flusso, considerare l'uso di appropriati controlli isotipo, il blocco del recettore Fc e coloranti di vitalità per minimizzare il legame aspecifico.
• Se si estende ad altre applicazioni (es. Western blot, IHC), gli utenti dovrebbero validare le prestazioni nel loro specifico sistema sperimentale, poiché l'anticorpo è attualmente verificato solo per FC.

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