Anticorpo monoclonale coniglio anti-mouse CD14 per FC - P10810

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD14

• Il CD14 è un antigene di differenziazione dei monociti e una glicoproteina ricca di leucina specifica delle cellule mieloidi, appartenente alla famiglia delle ripetizioni ricche di leucina (LRR) e ancorata alla membrana tramite un gruppo glicosilfosfatidilinositolo (GPI).
• Agisce come corecettore per il lipopolisaccaride batterico (LPS), legando il LPS monomerico in concerto con LBP e consegnandolo al complesso LY96/TLR4 per avviare le risposte immunitarie innate. Riferimenti correlati: PMID:16148141
• La segnalazione LPS-CD14 procede tramite la via MyD88/TIRAP/TRAF6, portando all'attivazione di NF-kappa-B, alla secrezione di citochine e alle risposte infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:15895089, PMID:8612135
• Funziona anche come corecettore per i lipopeptidi batterici: sinergizza con TLR2:TLR6 per i lipopeptidi diacilati e con TLR2:TLR1 per i lipopeptidi triacilati; la segnalazione avviene dalla superficie cellulare, seguita dal traffico dipendente dai lipid raft verso l'apparato di Golgi.
• Agisce come recettore accessorio per le lipoproteine LprA, LprG e LpqH di M. tuberculosis, cooperando con TLR2 e TLR1 per modulare le funzioni delle cellule presentanti l'antigene. Riferimenti correlati: PMID:19362712
• Si localizza alla membrana cellulare, ai raft di membrana e all'apparato di Golgi; viene generata anche una forma secreta solubile.
• Espresso a livello proteico sui macrofagi peritoneali e sui macrofagi alveolari/dendritici polmonari. Riferimenti correlati: PMID:8612135, PMID:19362712
• Modificato post-traduzionalmente: contiene un sito di ancoraggio GPI, legami disolfuro e glicosilazione N-legata, contribuendo alla sua stabilità strutturale e funzione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione lavorativa ottimale per il sistema cellulare; le diluizioni iniziali tipiche variano da 1:50 a 1:200.
• Utilizzare controlli isotipici appropriati e considerare il blocco dei recettori Fc per ridurre il legame aspecifico, specialmente quando si lavora con cellule mieloidi.
• Se è necessaria la colorazione intracellulare, fissare e permeabilizzare le cellule dopo la colorazione di superficie; notare che il CD14 è espresso principalmente sulla superficie ma può internalizzarsi dopo il legame del ligando.
• Validare la colorazione su popolazioni note CD14-positivi, come i macrofagi peritoneali o i macrofagi alveolari polmonari, per confermare specificità e sensibilità.

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