Anticorpo monoclonale coniglio anti-topo CD140b/PDGFR beta per citometria a flusso - P05622

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del recettore beta del fattore di crescita derivato dalle piastrine

• Il recettore beta del fattore di crescita derivato dalle piastrine (PDGFR beta, PDGFR-1, CD140b), codificato dal gene Pdgfrb nel topo, è un membro della famiglia delle tirosin-chinasi recettoriali di tipo III, caratterizzata da domini extracellulari simili alle immunoglobuline e un dominio chinasi intracellulare diviso.
• Funge da recettore di superficie cellulare per PDGFB e PDGFD omodimerici, nonché per eterodimeri formati da PDGFA e PDGFB, svolgendo un ruolo essenziale nello sviluppo embrionale, nella proliferazione cellulare, nella sopravvivenza, nella differenziazione, nella chemiotassi e nella migrazione.
• PDGFR beta è fondamentale per la maturazione dei vasi sanguigni: promuove la proliferazione, la migrazione e il reclutamento di periciti e cellule muscolari lisce vascolari verso le cellule endoteliali, ed è necessario per il normale sviluppo del sistema cardiovascolare.
• Nel rene, è necessario per il reclutamento delle cellule mesangiali nel glomerulo e per la formazione di una rete capillare ramificata; la sua espressione è upregolata nella fibrosi renale.
• Il legame con il ligando attiva molteplici cascate di segnalazione a valle, tra cui la mobilizzazione del calcio mediata da PLCG1 e l'attivazione di PKC, le vie PI3K–AKT e Ras–MAPK, portando alla riorganizzazione del citoscheletro e alla formazione di ruffling membrane.
• Il recettore si localizza principalmente sulla membrana cellulare, ma può essere internalizzato in vescicole citoplasmatiche e degradato nel lume lisosomiale dopo l'attivazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-linked, fosforilazione su residui di tirosina e serina/treonina, formazione di legami disolfuro e ubiquitinazione; lo splicing alternativo produce molteplici isoforme.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è direttamente coniugato ad , pertanto non richiede un reagente di rilevazione secondario per la citometria a flusso.
• Per una colorazione ottimale, titrare l'anticorpo (ad esempio, 0,25–2,0 µg per milione di cellule) nel tipo cellulare corrispondente per determinare il miglior rapporto segnale/rumore.
• Utilizzare un appropriato blocco dei recettori Fc e includere coloranti di vitalità per escludere le cellule morte e ridurre il legame non specifico.
• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare N-terminale (aa 32–530), che suggerisce la reattività con l'ectodominio; la fissazione con paraformaldeide può essere compatibile ma deve essere validata.
• Validare l'espressione di PDGFR beta nella vostra popolazione target includendo controlli positivi noti (ad esempio, fibroblasti NIH/3T3, cellule muscolari lisce vascolari) e controlli negativi.

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