Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD22 di topo per IF-P e FC - P35329

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD22

• CD22 (Siglec-2, BL-CAM) è la lectina di tipo immunoglobulinico legante l'acido sialico (siglec) maggiormente espressa sulle cellule B ed è fondamentale per la differenziazione delle cellule B, la presentazione dell'antigene e il loro homing nel midollo osseo. Riferimenti correlati: PMID:7533044 PMID:9016707
• Funziona come co-recettore inibitorio che attenua la segnalazione del recettore delle cellule B (BCR) reclutando la tirosina fosfatasi PTPN6/SHP-1 in seguito alla fosforilazione dei suoi motivi ITIM da parte di LYN, determinando una ridotta mobilizzazione del calcio e una minore attivazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:9016707
• CD22 lega i residui di acido sialico legati in posizione α2,6 presenti su sé stesso e su altre molecole di superficie, come CD45 e IgM, in cis, e agisce inoltre come molecola di adesione cellulare attraverso interazioni trans con ligandi presenti su altre cellule.
• La proteina è una glicoproteina transmembrana di tipo I appartenente alla famiglia delle lectine di tipo immunoglobulinico siglec, caratterizzata da un dominio Ig N-terminale di tipo V e da numerose ripetizioni Ig di tipo C2.
• Lo splicing alternativo produce molteplici isoforme, con pesi molecolari osservati di circa 89, 93 e 97 kDa, coerenti con la forma a lunghezza completa di 97 kDa descritta e con potenziali varianti di splicing.
• CD22 è espresso specificamente sui linfociti B ed è localizzato sulla membrana cellulare, dove si sposta tra la superficie cellulare e i compartimenti intracellulari.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione legata all'azoto, la fosforilazione dei residui di tirosina all'interno dei motivi ITIM e simili agli ITIM e la formazione di ponti disolfuro.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno deriva dalla regione extracellulare (aa 22-151) del CD22 di topo, rendendo questo anticorpo adatto al rilevamento del CD22 esposto sulla superficie di cellule non permeabilizzate.
• Per la citometria a flusso (FC), si consiglia di titolare l'anticorpo su linee cellulari B di topo pertinenti o su splenociti primari per determinare la concentrazione ottimale di colorazione e ridurre al minimo il background.
• Nell'immunofluorescenza su tessuti inclusi in paraffina (IF-P), ottimizzare le condizioni di recupero antigenico, poiché l'epitopo potrebbe essere parzialmente mascherato dalla fissazione in formalina, e includere controlli appropriati (ad esempio, cellule CD22-negative).
• Il colorante coniugato è compatibile con i canali standard di rilevamento del rosso/arancione; assicurarsi della separazione spettrale nel caso di multiplexing con altri fluorofori.
• CD22 è un marcatore delle cellule B ampiamente validato; questo anticorpo può essere utilizzato per identificare le popolazioni di linfociti B nei tessuti di topo, ma la reattività crociata con altre specie non è stata testata oltre il topo.

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