Coniglio anti-Mouse CD28 Anticorpo Monoclonale per Citometria a Flusso - P31041

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD28

• CD28 è una glicoproteina di superficie specifica delle cellule T che funge da recettore co-stimolatorio essenziale per l'attivazione, la proliferazione, la sopravvivenza e il mantenimento dell'omeostasi immunitaria delle cellule T (PubMed:7688139). Riferimenti correlati: PMID:7688139
• Agisce come amplificatore dei segnali del recettore delle cellule T (TCR) e fornisce segnali intracellulari unici che alterano il programma di espressione genica delle cellule T.
• Al momento dell'ingaggio dei suoi ligandi CD80 (B7-1) o CD86 (B7-2), CD28 potenzia la produzione di multiple citochine, più prominentemente IL-2, sia nei subset di cellule T CD4+ che CD8+.
• La segnalazione coinvolge il reclutamento della proteina chinasi C-teta (PRKCQ) e GRB2, portando all'attivazione di NF-kappa-B attraverso vie dipendenti e indipendenti da PI3K/Akt.
• In congiunzione con il legame di TCR/CD3 e la co-stimolazione di CD40L, CD28 promuove la produzione di IL-4 e IL-10 nelle cellule T.
• CD28 è localizzato sulla membrana cellulare ed è una proteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo contenente un dominio extracellulare di tipo V simile a immunoglobulina.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-legata, formazione di ponti disolfuro e fosforilazione, che regolano la sua espressione di superficie e le funzioni di segnalazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (aminoacidi 20–149) copre il dominio extracellulare, rendendo questo anticorpo monoclonale adatto per rilevare il CD28 nativo sulla superficie cellulare mediante citometria a flusso.
• Per la FC, titolare l'anticorpo coniugato per determinare la concentrazione ottimale di colorazione e includere un controllo isotipico per valutare il legame non specifico.
• ha massimi di eccitazione/emissione ~650/665 nm; assicurare una corretta compensazione quando combinato con altri fluorofori (es. PE, FITC) in pannelli multicolor.
• Validare la colorazione su linee cellulari T murine note positive per CD28 o splenociti attivati primari, e considerare la fissazione/permeabilizzazione se vengono analizzati anche bersagli intracellulari.

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