Anticorpo monoclonale coniugato coniglio anti-CD45 di topo per citometria a flusso - P06800

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD45

• Il CD45 è una tirosin-proteina fosfatasi di tipo recettore C, nota anche come antigene comune dei leucociti (L-CA), antigene linfocitario 5 (Ly-5) e T200.
• Svolge un ruolo critico nell'attivazione dei linfociti T attraverso il recettore dell'antigene, agendo come regolatore positivo della co-attivazione dei linfociti T dopo il legame con DPP4.
• Il primo dei suoi due domini fosfatasici intracellulari possiede attività enzimatica, mentre il secondo modula la specificità del substrato.
• Il CD45 è localizzato prevalentemente sulla membrana cellulare, nei raft di membrana e nella sinapsi immunologica.
• Interagisce e defosforila molecole chiave di segnalazione come SKAP1, FYN e LYN, modulando le vie di segnalazione a valle.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme, dando origine a proteine di peso molecolare variabile, coerenti con le specie osservate di 130 kDa, 140 kDa e 144 kDa.
• La proteina è altamente glicosilata e subisce fosforilazione, classificandola come glicoproteina e fosfoproteina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (amminoacidi 26–566), suggerendo che l'anticorpo riconosca un epitopo extracellulare, rendendolo adatto per applicazioni di citometria a flusso su cellule vive.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per la specifica popolazione cellulare in uso.
• Durante la validazione della specificità, considerare la presenza di isoforme del CD45 con pesi molecolari diversi; confermare il pattern di bande atteso nei lisati cellulari rilevanti se si adatta l'anticorpo per il Western blotting.
• Utilizzare controlli isotipo appropriati e assicurare una corretta compensazione quando si utilizza il fluoroforo in pannelli di citometria a flusso multicolore.

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