Rabbit anti-Mouse CD45.1 mAb - P06800

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di CD45.1

• CD45 (Proteina tirosina fosfatasi di tipo recettore C) è una fosfatasi transmembrana codificata dal gene Ptprc nei topi. Lo splicing alternativo genera più isoforme, tra cui CD45.1, che differiscono per la lunghezza del dominio extracellulare e la glicosilazione.
• CD45 funziona come regolatore positivo dell'attivazione delle cellule T defosforilando i residui di tirosina a regolazione negativa sulle chinasi della famiglia Src (ad esempio LYN e FYN) sull'adattatore SKAP1, facilitando la trasduzione del segnale del TCR.
• La regione intracellulare contiene due domini fosfatasi in tandem; il dominio D1 vicino alla membrana fornisce l'attività catalitica, mentre il dominio D2 modula la specificità del substrato.
• Oltre ai componenti del TCR, CD45 interagisce con DPP4 per potenziare la costimolazione e con CLEC10A sulle cellule dendritiche immature per limitare l'autoreattività, evidenziando il suo ruolo nell'omeostasi immunitaria.
• È ancorato alla membrana plasmatica e si ripartisce nelle zolle lipidiche; durante l'attivazione delle cellule T, CD45 si ridistribuisce verso la sinapsi immunologica per formare microcluster di segnalazione.
• CD45 subisce un'estesa glicosilazione N-linked e fosforilazione di serina/treonina/tirosina, che regolano la sua localizzazione, conformazione e attività enzimatica.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza extracellulare (aa 311–410) della CD45.1 di topo, indicando che l'anticorpo riconosce probabilmente la forma nativa legata alla membrana, rendendolo particolarmente adatto per la colorazione di superficie in citometria a flusso.
• Poiché l'anticorpo è pre-coniugato ad , può essere utilizzato direttamente in pannelli multicolore senza colorazione secondaria; si raccomanda di predisporre controlli di compensazione adeguati.
• Per risultati ottimali in citometria a flusso, raccomandiamo di titolare l'anticorpo sulla tua specifica popolazione cellulare per determinare la concentrazione di saturazione e minimizzare il segnale di fondo.
• Poiché CD45.1 è espressa ampiamente su tutte le cellule della linea ematopoietica, includi controlli di isotipo appropriati e gating FSC/SSC per distinguere i sottogruppi di leucociti.
• Quando si colorano tessuti o cellule con elevata espressione di recettori Fc, si consiglia una pre-incubazione con blocco Fc per ridurre il legame non specifico.

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