Anticorpo monoclonale coniglio contro topo CD5 per citometria a flusso - P13379

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD5

• CD5 è un recettore linfide-specifico espresso su tutte le cellule T e sulla sottopopolazione B1a delle cellule B, svolge un ruolo nella regolazione della segnalazione di TCR/BCR, nella selezione dei timociti e nella tolleranza immunitaria. Riferimenti correlati: PMID:35720357
• Interagisce con i ligandi delle cellule B CD5L e CD72, mediando l'aiuto delle cellule T dipendente dal contatto per le cellule B e mantenendo l'omeostasi regolatoria delle cellule T/B. Riferimenti correlati: PMID:24950378, PMID:9064341, PMID:9723705
• CD5 funziona come regolatore negativo della segnalazione del TCR durante lo sviluppo dei timociti reclutando proteine di segnalazione come LCK, CD3ζ, PI3K e CBL. Riferimenti correlati: PMID:11157848
• Il co-impegno di CD5 con CD3 promuove la fosforilazione di CBL e la degradazione di VAV1, attenuando la segnalazione a valle (per similarità).
• Nelle cellule B1a, CD5 modula l'attivazione delle cellule B attraverso l'afflusso di Ca²⁺ mediato da TRPC1, portando all'attivazione di ERK1/2 e alla produzione di IL-10 (per similarità).
• La proteina si localizza sulla membrana cellulare come glicoproteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo, con ripetizioni ricche di cisteine del recettore scavenger extracellulare, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica contenente siti di fosforilazione.
• CD5 è anche conosciuto come Ly-1, Ly-A, Ly-12 o Lyt-1 e funge da marcatore pan-T e marcatore delle cellule B1a nei topi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 25-371 di CD5 di topo, corrispondenti all'intero dominio extracellulare, permettendo il riconoscimento di CD5 superficiale nativo su cellule vitali senza permeabilizzazione.
• Per la citometria a flusso, eseguire una serie di diluizioni (ad esempio 1:25 – 1:200) per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il tuo campione cellulare.
• Utilizzare appropriati anticorpi di controllo isotipo-matched e includere coloranti di vitalità per discriminare tra cellule vive e morte e minimizzare il fondo.
• Proteggere l'anticorpo dalla luce durante la colorazione e lo stoccaggio, poiché l'esposizione ripetuta può ridurre la fluorescenza di .
• I protocolli di colorazione standard raccomandano di incubare 10⁶ cellule in 100 µL di tampone di colorazione per 20-30 minuti su ghiaccio al buio, seguito da lavaggio.
• Questo anticorpo è specifico per CD5 di topo; non sono state riportate reattività crociate con altre specie; si consiglia la convalida nel tuo tessuto bersaglio.

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