Anticorpo monoclonale coniglio topo CD62L per citometria a flusso - P18337

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della L-selectina

• La L-selectina (CD62L, Ly-22) è una lectina calcio-dipendente (tipo C) che media l'adesione cellulare legandosi ai ligandi glicoproteici sulle cellule vicine, svolgendo un ruolo centrale nel traffico leucocitario. Riferimenti correlati: PMID:1693096
• È una glicoproteina transmembrana, con un dominio lectina di tipo C N-terminale, un dominio simile all'EGF, due domini sushi (CCP/SCR), una regione transmembrana e una breve coda citoplasmatica (basato sulle parole chiave e le annotazioni di dominio di UniProt).
• La L-selectina è espressa prevalentemente sulla superficie dei leucociti, inclusi i linfociti, ed è necessaria per l'homing linfocitario, mediando l'adesione alle venule endoteliali alte (HEV) nei linfonodi periferici.
• Dopo l'attivazione leucocitaria, la L-selectina subisce una rapida rimozione proteolitica dalla superficie cellulare, che regola il rotolamento e la transmigrazione dei leucociti.
• Partecipa anche al legame iniziale e al rotolamento dei leucociti lungo l'endotelio attivato nei siti di infiammazione, un prerequisito per l'adesione stabile e l'extravasazione.
• Subcellularmente, la L-selectina è localizzata sulla membrana cellulare e si raggruppa sulle punte dei microvilli, il che facilita la sua interazione con i ligandi in condizioni di flusso.
• Famiglia genica: SELL appartiene alla famiglia delle selectine (SELL, SELE, SELP), che sono glicoproteine transmembrana di tipo I che condividono un'architettura di dominio simile e mediano le interazioni cellula-cellula nel sistema vascolare.
• Specificità tissutale: Espressa principalmente nei tessuti linfoidi, coerente con il suo ruolo nella ricircolazione dei linfociti e nella sorveglianza immunitaria.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre la regione extracellulare (aa 39–332) della CD62L di topo, che comprende i domini lectina e simile all'EGF, probabilmente esposti sulla superficie cellulare; pertanto, l'anticorpo monoclonale ottenuto è particolarmente adatto per rilevare la CD62L nativa su cellule vive mediante citometria a flusso.
• Come anticorpo monoclonale ricombinante di coniglio, offre un'elevata consistenza tra lotti e affinità, riducendo al minimo la variabilità in applicazioni sensibili.
• Il coniugato fornisce un'etichetta fluorescente nel rosso estremo con elevata luminosità e fotostabilità, ideale per pannelli di citometria a flusso multicolore con sovrapposizione minima nella gamma visibile.
• Poiché la CD62L viene rapidamente rimossa dopo la stimolazione cellulare, è consigliabile ottimizzare le fasi di preparazione del campione (ad esempio temperatura, tempo di stimolazione) per preservare l'espressione superficiale e garantire una colorazione riproducibile.
• Sebbene il peso molecolare previsto sia di 42 kDa, la proteina glicosilata matura può migrare con un peso molecolare apparente più alto in SDS-PAGE; se adattata per Western blot, convalidare in condizioni riducenti appropriate.

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