Rabbit anti-Mouse CD68 mAb per IF/ICC e FC - P31996

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD68

• Il CD68, noto anche come macrosialina, Lamp4, gp110 o Scard1, è una proteina transmembrana pesantemente glicosilata appartenente alla famiglia delle glicoproteine di membrana associate ai lisosomi/endosomi (LAMP).
• È espresso prevalentemente nei macrofagi tissutali e, in minor misura, nelle cellule dendritiche, fungendo da marcatore classico per questi tipi di cellule fagocitarie.
• Il CD68 svolge un ruolo nelle attività fagocitarie, partecipando al metabolismo lisosomiale intracellulare e mediando le interazioni extracellulari cellula-cellula e cellula-patogeno.
• La proteina si lega a lectine o selectine specifiche di tessuto e organo, facilitando l'homing di sottopopolazioni di macrofagi verso siti specifici all'interno dell'organismo.
• Il CD68 ricicla rapidamente tra endosomi, lisosomi e la membrana plasmatica, un processo che potrebbe consentire ai macrofagi di strisciare su substrati che portano selectine o su altre cellule.
• A livello subcellulare, il CD68 si localizza sulle membrane degli endosomi, dei lisosomi e sulla membrana cellulare, in linea con il suo traffico dinamico e i suoi ruoli funzionali.
• La proteina contiene un peptide segnale, un grande dominio luminale/extracellulare con ripetizioni simili alla mucina, un'elica transmembrana singola e una breve coda citoplasmatica, ed è soggetta a splicing alternativo e formazione di legami disolfuro.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare l'inclusione di una fase di permeabilizzazione (es. con Triton X-100 o saponina) per rilevare i pool intracellulari di CD68 nei lisosomi/endosomi, poiché la proteina risiede in questi compartimenti.
• Per la citometria a flusso (FC), testare sia protocolli su cellule vive che su cellule fissate/permeabilizzate per catturare l'espressione di CD68 localizzata sulla superficie e totale. Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il proprio tipo di cellule specifico e le condizioni sperimentali.
• Utilizzare controlli di isotipo appropriati e controlli FMO (Fluorescence Minus One) per confermare la specificità della colorazione, specialmente quando si analizzano popolazioni di macrofagi e cellule dendritiche.
• Poiché l'immunogeno copre gli amminoacidi 21–291 del CD68 murino (coprendo il dominio extracellulare/luminale), ci si aspetta che l'anticorpo riconosca la proteina nativa sia in condizioni denaturanti che native, ma confermare le prestazioni nella specifica applicazione tramite esperimenti pilota.

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