Coniglio anti-Mouse CD68 Anticorpo Monoclonale per IF/ICC, FC - P31996

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Macrosialina (CD68)

• La macrosialina (CD68) è una proteina transmembrana di tipo I pesantemente glicosilata appartenente alla famiglia LAMP, espressa prevalentemente nei macrofagi tissutali e, in minor misura, nelle cellule dendritiche.
• Svolge un ruolo chiave nelle attività fagocitarie dei macrofagi, partecipando sia al metabolismo lisosomiale intracellulare che alle interazioni cellula-cellula e cellula-patogeno extracellulari.
• Il CD68 può legare le lectine specifiche di tessuto e organo o le selectine, facilitando l'homing di sottopopolazioni di macrofagi verso siti particolari.
• Il rapido riciclo del CD68 dagli endosomi e lisosomi alla membrana cellulare potrebbe consentire ai macrofagi di strisciare su substrati che portano selectine o su altre cellule.
• La proteina è localizzata sulle membrane degli endosomi, dei lisosomi e della membrana cellulare, coerente con la sua funzione di traffico endocitico.
• Vengono prodotte multiple isoforme tramite splicing alternativo e la proteina presenta legami disolfuro e un'ampia glicosilazione, contribuendo alla sua stabilità strutturale e al riconoscimento immunitario.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (amminoacidi 21-291) del CD68 murino, suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce un epitopo esposto adatto per la colorazione di superficie in citometria a flusso e applicazioni di immunofluorescenza.
• Per la citometria a flusso, la colorazione di superficie delle cellule viventi potrebbe essere fattibile senza permeabilizzazione, ma è consigliabile validare i pattern di colorazione sia in campioni di macrofagi non permeabilizzati che permeabilizzati.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, condizioni di fissazione e permeabilizzazione lievi (es. 4% PFA seguito da 0,1% Triton X-100) dovrebbero consentire il rilevamento del pool cellulare totale di CD68, inclusi i compartimenti endosomiali/lisosomiali.
• Considerare l'utilizzo di questo anticorpo per identificare le popolazioni di macrofagi nei tessuti murini, come la milza e il linfonodo, con appropriati controlli isotipici.
• A causa della coniugazione con il colorante, evitare cicli di congelamento-scongelamento e proteggere da una prolungata esposizione alla luce per mantenere l'intensità della fluorescenza.

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