Anticorpo monoclonale Coniglio anti-Mouse CD68 per citometria a flusso intracellulare - P31996

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD68

• CD68 (macrosialina, nota anche come Lamp4, gp110, Scard1) è una proteina transmembrana altamente glicosilata appartenente alla famiglia delle proteine di membrana associate ai lisosomi (LAMP).
• È espressa prevalentemente nei macrofagi tissutali e, in misura minore, nelle cellule dendritiche.
• CD68 svolge un ruolo nelle attività fagocitiche dei macrofagi, partecipando sia al metabolismo lisosomiale intracellulare sia alle interazioni extracellulari cellula-cellula e cellula-patogeno.
• Facilita l'homing dei macrofagi verso specifici siti tissutali legandosi a lectine o selectine specifiche per tessuto e organo.
• La proteina ricicla rapidamente tra endosomi, lisosomi e membrana plasmatica, un processo che potrebbe supportare la migrazione dei macrofagi su substrati che esprimono selectine.
• A livello subcellulare, CD68 si localizza principalmente sulle membrane di endosomi e lisosomi, con una certa espressione anche sulla membrana plasmatica.
• Le caratteristiche strutturali includono un peptide segnale, un'elica transmembrana, molteplici legami disolfuro e siti di glicosilazione N-linked, coerenti con il suo targeting lisosomiale e la sua stabilità.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio luminal di CD68 (aa 21-291); questa regione risulta esposta dopo permeabilizzazione, rendendo l'anticorpo adatto per la citometria a flusso intracellulare.
• Per FC (intra), ottimizzare i passaggi di fissazione e permeabilizzazione per il tuo specifico tipo di macrofago o cellula dendritica; si consiglia di utilizzare un appropriato controllo isotipo per valutare il segnale di fondo.
• A causa dell'elevata glicosilazione di CD68, condizioni denaturanti o alcuni protocolli di fissazione possono alterare il riconoscimento dell'epitopo; si raccomanda di eseguire esperimenti di titolazione preliminari.
• Sebbene sia validato per citometria a flusso, l'anticorpo potrebbe essere compatibile anche con immunoistochimica o ELISA se l'epitopo rimane accessibile; gli utenti dovranno validarlo nei loro sistemi di campione target.

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