Anticorpo monoclonale coniugato coniglio anti-topo CD69 per Citometria a flusso - P37217

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD69

• L'antigene di attivazione precoce CD69 è un recettore transmembrana di tipo lectina C che viene rapidamente sovraregolato sulla superficie di piastrine, linfociti T e cellule NK dopo l'attivazione, svolgendo un ruolo centrale nell'omeostasi e nella segnalazione delle cellule immunitarie.
• Regola negativamente la differenziazione delle cellule Th17 attraverso l'interazione dipendente da carboidrati con galectina-1/LGALS1 su cellule dendritiche immature, e l'associazione della coda citoplasmatica con la segnalazione JAK3/STAT5 controlla la trascrizione di RORγt. Riferimenti correlati: PMID:20696842
• Agisce come regolatore negativo della chemiotassi di linfociti e cellule dendritiche agendo come agonista del recettore 1 della sfingosina 1-fosfato (S1PR1), promuovendone l'internalizzazione e la degradazione. Riferimenti correlati: PMID:16525420
• Negli eosinofili, l'ingaggio di CD69 induce la produzione di IL-10 attraverso l'attivazione della via ERK1/2, contribuendo alle funzioni immunoregolatorie. Riferimenti correlati: PMID:38540778
• Funziona anche come recettore per le lipoproteine a bassa densità ossidate (oxLDL) nei linfociti T CD4, regolando negativamente le risposte infiammatorie tramite l'induzione NFAT-dipendente di PDCD1, e promuove la conversione in cellule T regolatorie attraverso l'interazione con il complesso S100A8/S100A9.
• Si localizza sulla membrana cellulare con una topologia transmembrana a passaggio singolo e una sequenza segnale-ancora; il dominio extracellulare include un dominio di riconoscimento dei carboidrati (CRD) (UniProt: P37217).
• Specificità tissutale: rilevato sulla superficie di cellule T attivate, cellule B, cellule natural killer, neutrofili, piastrine ed eosinofili.
• Le modifiche post-traduzionali includono la formazione di ponti disolfuro, la glicosilazione N-linked e la fosforilazione, come indicato dalle parole chiave: "Ponte disolfuro", "Glicoproteina", "Fosfoproteina".

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato (aa 64–199 del CD69 di topo) copre la maggior parte del dominio di riconoscimento dei carboidrati (CRD) extracellulare, che è esposto sulla superficie cellulare; questo design probabilmente garantisce un riconoscimento efficiente della proteina nativa nella citometria a flusso.
• Per le applicazioni di citometria a flusso, considerare di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il tipo cellulare specifico e le impostazioni dello strumento.
• Includere controlli appropriati come controlli negativi isotipo-accoppiati, controlli "fluorescence-minus-one" (FMO) e discriminazione cellule vive/morte per identificare accuratamente le popolazioni CD69-positive.
• Convalidare la specificità colorando cellule di topi knockout per CD69 o utilizzando un peptide/proteina bloccante se disponibile, per confermare che il segnale sia dipendente dall'antigene.
• Essere consapevoli che CD69 è un marcatore di attivazione rapida; il tempo di stimolazione e le condizioni di fissazione/permeabilizzazione potrebbero richiedere ottimizzazione a seconda del contesto biologico.

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