Anticorpo monoclonale coniglio contro topo Flt3/CD135 per FC - Q00342

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Flt3/CD135

• La tirosin-proteina chinasi recettoriale FLT3 (conosciuta anche come CD135, FLK-2, chinasi fetale del fegato 2) agisce come recettore di superficie cellulare per la citochina FLT3LG, regolando la differenziazione, la proliferazione e la sopravvivenza delle cellule progenitrici ematopoietiche e delle cellule dendritiche.
• Dopo il legame con il ligando, FLT3 promuove la fosforilazione di SHC1 e AKT1, l'attivazione di MTOR e la segnalazione dipendente da RAS tramite MAPK1/ERK2 e MAPK3/ERK1. Meda inoltre la fosforilazione di FES, FER, PTPN6/SHP, PTPN11/SHP-2, PLCG1 e STAT5A/STAT5B, anche se l'attivazione di STAT5 da parte di FLT3 selvatico è marginale.
• Le mutazioni che causano attività chinasi costitutiva guidano la proliferazione cellulare e la resistenza all'apoptosi attraverso molteplici vie a valle, evidenziando il suo ruolo proto-oncogenico.
• L'espressione tissutale è prevalentemente nelle popolazioni arricchite di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche, con ulteriori rilevazioni nel cervello, nella placenta e nel testicolo.
• Subcellolarmente, FLT3 si localizza sulla membrana plasmatica e nel lume del reticolo endoplasmatico.
• La proteina presenta domini extracellulari di tipo immunoglobulina, una singola elica transmembrana e un dominio chinasi tirosinico intracellulare. Le modifiche post-traduzionali chiave includono glicosilazione, formazione di legami disolfuro e autofosforilazione indotta dal ligando.
• Parole chiave associate a FLT3: legame ATP, legame disolfuro, glicoproteina, dominio immunoglobulina, chinasi, membrana, legame nucleotidico, fosfoproteina, proto-oncogene, recettore, transferasi, elica transmembrana, tirosin-proteina chinasi, coniugazione Ubl.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende una proteina di fusione ricombinante che copre gli aminoacidi 28–544 di CD135 di topo (NP_034359.2). Si consiglia di verificare la reattività con la proteina nativa su cellule ematopoietiche primarie di topo.
• Per la citometria a flusso, titrare l'anticorpo su cellule della milza o del midollo osseo di topo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale. Utilizzare il blocco dei recettori Fc per minimizzare il legame non specifico.
• Durante la progettazione di pannelli multicolore, tenere conto delle proprietà spettrali del fluoroforo ed eseguire controlli di compensazione appropriati.
• L'anticorpo è consigliato per campioni di topo; la reattività incrociata con altre specie non è stata riportata e deve essere testata autonomamente se necessaria.
• Convalidare la specificità confrontando la colorazione in modelli knockout per Flt3 o con linee cellulari che esprimono CD135 in modo differenziale.
• Poiché FLT3 funziona nel mantenimento delle cellule staminali ematopoietiche e nello sviluppo delle cellule dendritiche, questo reagente può supportare l'immunofenotipizzazione, la rilevazione di cellule staminali leucemiche o lo studio della segnalazione indotta da FLT3-ITD.

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