Anticorpo monoclonale di coniglio anti-IFN-gamma di topo per FC (intracellulare) - P01580

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'interferone gamma

• L'interferone gamma (IFNG) è una citochina di tipo II prodotta principalmente dai linfociti T attivati e dalle cellule NK.
• Svolge ruoli fondamentali nelle risposte antimicrobiche, antivirali e antitumorali, attivando le cellule immunitarie effettrici e potenziando la presentazione dell'antigene. Riferimenti correlati: PMID:11585387, PMID:8456301
• IFNG trasmette il segnale attraverso la via JAK-STAT tramite IFNGR1, portando all'attivazione di STAT1 e alla trascrizione dei geni regolati da IFNG, incluso IRF1.
• Potenzia la presentazione dell'antigene MHC di classe I inducendo le subunità dell'immunoproteasoma e l'attivatore PA28, e aumenta l'espressione dei complessi MHC di classe II tramite le catepsine B, H e L (per similarità).
• Partecipa alla regolazione delle cellule staminali ematopoietiche, influenzandone lo sviluppo, la quiescenza e la differenziazione. Riferimenti correlati: PMID:20535209, PMID:25078851
• Glicoproteina secreta con un peso molecolare di circa 18 kDa, ampiamente utilizzata come marcatore delle risposte Th1.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (IFNG murino ricombinante a lunghezza completa) supporta l'idoneità dell'anticorpo per la colorazione intracellulare; si consiglia di ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per il proprio tipo cellulare.
• Poiché IFNG è secreto, per accumulare la citochina e consentirne il rilevamento mediante citometria a flusso è generalmente necessaria la stimolazione con PMA/ionomicina in presenza di un inibitore del trasporto delle proteine (ad esempio, brefeldina A).
• Validare la specificità dell'anticorpo e il titolo ottimale utilizzando cellule murine deficienti per IFNG o esperimenti di blocco con IFNG ricombinante nel sistema di campioni di interesse.
• Per i pannelli multicolore, assicurarsi che la compensazione sia impostata correttamente, soprattutto quando si utilizzano altri anticorpi coniugati con PE o APC, a causa dell'elevata luminosità di .

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