Anticorpo monoclonale coniglio anti-topo IgE per FC - P06336

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della regione costante dell'IgE di topo

• La catena epsilon costante della catena pesante delle immunoglobuline (IgE) è la regione costante della catena pesante delle immunoglobuline e forma parte dell'anticorpo IgE. Questo isotipo di anticorpo svolge un ruolo centrale nelle risposte allergiche e nelle infezioni parassitarie.
• L'IgE funziona sia come recettore legato alla membrana sui linfociti B che come anticorpo secreto. L'IgE legato alla membrana agisce come recettore per le cellule B, innescando l'espansione clonale e la differenziazione in plasmacellule dopo il legame con l'antigene. L'IgE secreta si lega ai recettori Fcε ad alta affinità sui mastociti e sui basofili, mediando la degranulazione e l'infiammazione.
• Il processamento delle catene pesanti delle immunoglobuline coinvolge la ricombinazione V(D)J e l'ipermutazione somatica, che generano diversità e consentono la maturazione per affinità del sito di legame con l'antigene.
• L'IgE è espressa in due forme: una forma legata alla membrana sulla superficie dei linfociti B e una forma secreta rilasciata dalle plasmacellule. La forma secreta si trova negli spazi extracellulari e nei tessuti mucosi.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare per la forma legata alla membrana e lo spazio extracellulare per la forma secreta. La proteina subisce modifiche post-traduzionali come la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, essenziali per la sua struttura e la sua funzione.
• Come membro della superfamiglia delle immunoglobuline, la regione costante contiene domini immunoglobulinici che contribuiscono alle funzioni effettrici e alle interazioni con i recettori.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 83-421 dell'IgE di topo, coprendo gran parte della regione costante. Questo progetto garantisce probabilmente il riconoscimento dell'IgE nativa, ma gli utenti devono convalidare la specificità nel loro campione bersaglio.
• Per la citometria a flusso intracellulare, è necessario ottimizzare un protocollo di fissazione e permeabilizzazione adatto per le proteine intracellulari. Si consiglia di testare diversi tamponi di permeabilizzazione e tempi di reazione.
• Poiché l'IgE è espressa a bassi livelli nelle cellule B a riposo ma sovraregolata dopo l'attivazione, l'attivazione delle cellule B (ad esempio con IL-4 e anti-CD40) può migliorare la rilevazione.
• Utilizzare controlli di isotipo appropriati e la compensazione quando si analizza la fluorescenza . L'anticorpo reagisce con l'IgE di topo; in base all'immunogeno utilizzato non è prevista reattività crociata con altre specie.
• Convalidare il pattern di colorazione in linee cellulari note per esprimere IgE o in cellule B primarie di topo.

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