Anticorpo monoclonale coniugato coniglio anti-topo IgM per citometria a flusso - P01872

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della regione costante pesante dell'IgM

• La catena pesante costante mu delle immunoglobuline (catena pesante dell'IgM) è codificata dal gene Ighm nel topo; appartiene alla superfamiglia delle immunoglobuline e rappresenta il primo isotipo anticorpale espresso durante lo sviluppo delle cellule B.
• Funziona come regione costante sia dei recettori delle cellule B legati alla membrana (BCR) che dell'immunoglobulina M secreta (sIgM). La forma di membrana fornisce segnali di sopravvivenza tonica e media la segnalazione del pre-BCR, mentre l'IgM secreta si assembla in pentameri o esameri per un legame ad alta avidità con l'antigene.
• L'IgM secreta (sIgM) media le funzioni effettrici umorali reclutando il componente del complemento C1q per avviare la via classica e legando il recettore Fc ad alta affinità FCMR sulle cellule linfoidi, promuovendo le risposte delle IgG mantenendo al contempo l'autotolleranza. Riferimenti correlati: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• L'IgM partecipa all'immunità mucosale: la sIgM viene trasportata attraverso l'epitelio mucosale dal recettore delle immunoglobuline polimeriche (PIGR) e forma complessi antigenici che vengono retrotracitati via FCMR alle cellule presentanti l'antigene. Riferimenti correlati: PMID:34788614
• La proteina si localizza sulla membrana cellulare come parte del BCR ed è anche secreta; l'espressione è rilevata nel midollo osseo e nei sottogruppi di cellule B-1 e B-2.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-legata e numerosi ponti disolfuro essenziali per il corretto ripiegamento e multimerizzazione; lo splicing alternativo genera isoforme legate alla membrana e secrete.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare il coniugato per determinare la diluizione ottimale per il proprio tipo cellulare e protocollo di fissazione/permeabilizzazione.
• Includere un controllo isotipo appropriato e un colorante di vitalità per escludere le cellule morte dall'analisi.
• Considerare l'uso di un reagente di blocco del recettore Fc per minimizzare il legame aspecifico, specialmente quando si lavora con cellule mieloidi.
• Validare la colorazione con campioni di controllo positivi e negativi noti per esprimere IgM ai livelli attesi.

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