Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-Mouse IL1R1/CD121a per Citometria a Flusso - P13504

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IL1R1/CD121a

• Il recettore di tipo 1 dell'interleuchina-1 (IL1R1), noto anche come CD121a, IL-1R alfa, p80, è codificato dal gene Il1r1 nei topi.
• Funziona come recettore per l'interleuchina-1 alfa (IL1A), l'interleuchina-1 beta (IL1B) e l'antagonista del recettore dell'IL-1 (IL1RN), legando questi ligandi con affinità comparabile.
• Dopo il legame del ligando, IL1R1 si associa al corecettore IL1RAP per formare un complesso di segnalazione ad alta affinità, portando all'attivazione delle vie NF-kappa-B e MAPK.
• La segnalazione coinvolge il reclutamento mediato dal dominio TIR di proteine adattatrici come TOLLIP, MYD88, IRAK1 o IRAK2.
• L'isoforma 2 è espressa nei tessuti cerebrali e, insieme all'isoforma 3 di IL1RAP, media l'attività neuronale indotta da IL1B, inclusa la potenziazione dell'afflusso di calcio mediato dal recettore NMDA tramite l'attivazione della chinasi Akt.
• IL1R1 è una glicoproteina transmembrana con ponti disolfuro e domini simili alle immunoglobuline, appartenente alla famiglia dei recettori dell'interleuchina-1.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e glicosilazione; è stata identificata anche una forma secreta.
• Svolge un ruolo nelle risposte infiammatorie e nella costimolazione delle cellule T-helper 1 (Th1) per la produzione di IFNG.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 20–338) copre il dominio extracellulare di IL1R1 del topo, rendendolo adatto per rilevare l'espressione superficiale mediante citometria a flusso senza permeabilizzazione.
• Il coniugato viene eccitato dal laser a 488 nm ed emette nel canale verde (es. FITC/GFP); assicurarsi di applicare la compensazione se utilizzato in pannelli multicolore.
• Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare specifico e le condizioni di marcatura; le diluizioni iniziali tipiche vanno da 1:50 a 1:200.
• Includere un appropriato anticorpo controllo isotipo coniugato con lo stesso fluoroforo per valutare il legame aspecifico.
• I recettori Fc del topo possono essere bloccati utilizzando anti-CD16/CD32 (Fc Block) per ridurre il fondo, specialmente quando si utilizzano cellule con elevata espressione del recettore Fc.
• Preparare sospensioni di singole cellule e utilizzare un colorante di vitalità per escludere le cellule morte, che potrebbero legare anticorpi in modo aspecifico.
• La fissazione con paraformaldeide potrebbe influenzare l'epitopo; validare le condizioni di fissazione se è richiesta una fissazione post-marcatura.

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