Anticorpo policlonale di coniglio anti-PERK per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NZJ5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del PERK

• Il fattore 3 della chinasi dell'inizio della traduzione eucariotica 2-alfa (EIF2AK3), comunemente noto come PERK (chinasi del reticolo endoplasmatico simile a PRKR), è anche denominato chinasi eIF-2-alfa pancreatica (HsPEK), tirosina-proteina chinasi EIF2AK3, PEK e WRS.
• Agisce come una chinasi sensibile allo stress metabolico che fosforila la subunità alfa del fattore 2 dell'inizio della traduzione eucariotica (EIF2S1/eIF-2-alfa) in risposta allo stress del reticolo endoplasmatico, svolgendo il ruolo di effettore chiave della risposta alle proteine non correttamente ripiegate (UPR). Riferimenti correlati: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• In seguito all'attivazione, la fosforilazione di eIF-2-alfa mediata da PERK attenua la traduzione globale dipendente dal cap, promuovendo selettivamente la traduzione di mRNA specifici dell'ISR, come ATF4 e QRICH1, e consentendo la riprogrammazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• Inoltre, fosforila NFE2L2/NRF2 in condizioni di stress, promuovendone il rilascio dal complesso KEAP1, l'accumulo nucleare e l'attivazione dei geni della risposta antiossidante.
• Contribuisce alla regolazione mitocondriale: la segnalazione UPR dipendente da PERK aumenta la fosforilazione ossidativa inducendo l'espressione di COX7A2L/SCAF1 mediata da ATF4 e la formazione di supercomplessi della catena respiratoria; nei siti di contatto tra mitocondri e reticolo endoplasmatico, la sua attività è inibita da ATAD3A per proteggere la funzione mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:31023583, PMID:39116259
• È fondamentale per l'arresto della crescita in fase G1 indotto dalla UPR attraverso la perdita della ciclina D1 (CCND1).
• È localizzato nella membrana del reticolo endoplasmatico ed è espresso ubiquitariamente, con livelli particolarmente elevati nei tessuti secretori.
• Parole chiave: ADP-ribosilazione, legame all'ATP, risposta allo stress, regolazione della traduzione, serina/treonina-proteina chinasi, tirosina-proteina chinasi, risposta alle proteine non correttamente ripiegate.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (residui 867–1116) comprende il dominio chinasico; si prevede che l'anticorpo riconosca la regione citoplasmatica C-terminale del PERK.
• Per il Western blot, si prevede una banda specifica intorno a 125 kDa; convalidare utilizzando lisati cellulari o tissutali positivi e negativi appropriati.
• Nell'IHC-P e nell'IF/ICC, la colorazione dovrebbe riflettere la localizzazione nel reticolo endoplasmatico; si consiglia di utilizzare induttori dello stress del reticolo endoplasmatico (ad es., tunicamicina, tapsigargina) come controlli sperimentali.
• Per l'ELISA, la natura policlonale può fornire un'ampia copertura epitopica; titolare e confermare la specificità utilizzando la proteina PERK ricombinante o il PERK endogeno proveniente da campioni sottoposti a stress.

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