Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD31 di ratto per citometria a flusso - Q3SWT0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD31

• La molecola di adesione delle cellule endoteliali piastriniche (PECAM-1, CD31) è una glicoproteina transmembrana di tipo I a singolo passaggio appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, caratterizzata da sei domini extracellulari simili alle Ig e da una coda citoplasmatica con motivi inibitori basati sulla tirosina degli immunorecettori (ITIM).
• CD31 funziona come molecola di adesione chiave necessaria per la migrazione transendoteliale dei leucociti nella maggior parte delle condizioni infiammatorie, con Tyr-660 che svolge un ruolo critico nel traffico dal compartimento di riciclo del margine laterale (LBRC) durante la TEM.
• Media interazioni omofile che contribuiscono all'adesione cellula-cellula delle cellule endoteliali a livello delle giunzioni cellulari, mentre l'interazione eterofila con CD177 facilita la migrazione transendoteliale dei neutrofili.
• CD31 regola la fagocitosi mediata dai macrofagi: il legame omofilo trasmette un segnale di distacco che impedisce l'ingestione di leucociti adiacenti vitali, mentre i leucociti apoptotici disabilitano questo segnale, favorendo l'ancoraggio e la rimozione.
• CD31 modula inoltre l'attivazione del recettore BDKRB2 della bradichinina e influenza la segnalazione ERK1/2 indotta dalla bradichinina e dallo shock iperosmotico nelle cellule endoteliali; è stato inoltre implicato nella suscettibilità all'aterosclerosi.
• A livello subcellulare, CD31 è localizzato nella membrana cellulare, arricchito nelle zattere di membrana e concentrato a livello delle giunzioni cellulari, sottolineando il suo ruolo nella funzione di barriera endoteliale.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked, la formazione di ponti disolfuro e la fosforilazione dei residui di serina e tirosina, fondamentali per le sue funzioni di segnalazione e adesione.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è fornito come coniugato , ottimizzato per il rilevamento diretto del CD31 sulla superficie delle cellule di ratto mediante citometria a flusso, senza necessità di un anticorpo secondario.
• Si consiglia di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il tipo cellulare specifico e le condizioni sperimentali adottate.
• Per valutare il legame aspecifico, è necessario utilizzare un anticorpo di controllo isotipico appropriato coniugato allo stesso fluoroforo.
• CD31 è espresso sulle cellule endoteliali, sulle piastrine e su sottopopolazioni di leucociti; convalidare l'espressione nel proprio sistema di campioni utilizzando controlli positivi e negativi noti (ad esempio, linee cellulari endoteliali di ratto rispetto ai fibroblasti).
• Per la colorazione intracellulare o quando si lavora con cellule permeabilizzate, verificare che l'immunogeno ricombinante sia accessibile e che il fluoroforo rimanga stabile con il protocollo di fissazione/permeabilizzazione scelto.

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