Anticorpo monoclonale di coniglio anti-RalA per WB, ELISA - P11233

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RalA

• RalA è una piccola GTPasi multifunzionale che interagisce con distinti effettori a valle per regolare l'espressione genica, la migrazione cellulare, la proliferazione, la trasformazione oncogenica e il traffico di membrana. Riferimenti correlati: PMID:18756269 PMID:19306925 PMID:20005108
• Funziona come sensore del GTP per l'esocitosi dipendente dal GTP delle vescicole a nucleo denso e, attraverso il complesso RALA-esocista, controlla l'esocitosi delle zattere di membrana dipendente dalle integrine e la segnalazione della crescita. Riferimenti correlati: PMID:20005108
• Funziona come regolatore chiave della segnalazione di LPAR1 competendo con GRK2 per il legame a LPAR1 e modulando così le proprietà di segnalazione del recettore.
• È necessaria per la proliferazione indipendente dall'ancoraggio delle cellule trasformate. Riferimenti correlati: PMID:19306925
• Durante la mitosi, si localizza al solco di clivaggio e al corpo intermedio, dove contribuisce alla stabilizzazione e all'allungamento del ponte intracellulare e recluta i componenti dell'esocista tramite EXOC2. Riferimenti correlati: PMID:18756269
• Inoltre, nel corpo intermedio, controlla la fissione mitocondriale reclutando RALBP1, con conseguente fosforilazione e attivazione di DNM1L da parte della ciclina B-CDK1. Riferimenti correlati: PMID:21822277
• La localizzazione subcellulare comprende la membrana cellulare, il solco di clivaggio, il corpo intermedio, l'anello del corpo intermedio e il mitocondrio.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, prenilazione, metilazione e fosforilazione; appartiene alla superfamiglia delle piccole GTPasi e contiene un dominio di legame ai nucleotidi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 120–206 di RalA umano, prendendo di mira la regione C-terminale. Questo design può generare anticorpi che riconoscono RalA a lunghezza intera e potenzialmente isoforme o varianti di splicing contenenti questa sequenza.
• Nel Western blot, per RalA endogeno si prevede una banda a circa 24 kDa. Si raccomanda di ottimizzare le condizioni di lisi e di utilizzare controlli appropriati (ad esempio lisati che sovraesprimono RalA) per confermare la specificità, soprattutto considerando la possibile comigrazione con altre piccole GTPasi.
• L'anticorpo è reattivo verso RalA umano e di scimmia; la reattività crociata con altre specie deve essere verificata sperimentalmente, se necessario.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere impiegato come reagente di cattura o di rilevazione; titolare e validare con la proteina RalA ricombinante per stabilire la sensibilità e l'intervallo lineare del saggio.
• In quanto anticorpo monoclonale di coniglio, offre elevata specificità e coerenza tra i lotti, risultando adatto ai saggi quantitativi.

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