Anticorpo policlonale coniglio Raptor per WB, ELISA - Q8N122

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Raptor

• Raptor (RPTOR), noto anche come proteina impalcatura bersaglio p150 della rapamicina (TOR), è un componente centrale del complesso 1 del bersaglio meccanicistico della rapamicina (mTORC1), un sensore centrale di nutrienti conservato evolutivamente che stimola le reazioni anaboliche e la biosintesi di macromolecole per promuovere la generazione di biomassa cellulare e la crescita (PubMed:12150925, PubMed:12150926, PubMed:12747827).
  Riferimenti correlati: PMID:12150925, PMID:12150926, PMID:12747827
• All'interno di mTORC1, Raptor agisce come adattatore molecolare che media il reclutamento del complesso alle membrane lisosomiali tramite interazione con piccole GTPasi (RagA/B/C/D) e promuove la specificità del substrato legandosi a proteine contenenti il motivo TOS, dirigendole verso il dominio chinasi MTOR per la fosforilazione (PubMed:12747827, PubMed:24403073, PubMed:26588989).
  Riferimenti correlati: PMID:12747827, PMID:24403073, PMID:26588989
• In risposta ai nutrienti, ai fattori di crescita o agli amminoacidi, mTORC1 fosforila i substrati a valle come le chinasi S6 della proteina ribosomale (RPS6KB1, RPS6KB2) e EIF4EBP1 (4E-BP1) per promuovere la sintesi proteica, lipidica e nucleotidica, inibendo al contempo le vie cataboliche fosforilando i componenti di iniziazione dell'autofagia ULK1 e ATG13, nonché il fattore di trascrizione TFEB (PubMed:12150925, PubMed:12150926, PubMed:12747827).
  Riferimenti correlati: PMID:12150925, PMID:12150926, PMID:12747827
• Raptor è localizzato principalmente alla membrana lisosomiale, al citoplasma e ai granuli citoplasmatici, coerentemente con il suo ruolo nella percezione e segnalazione dei nutrienti.
• La proteina è altamente espressa nel muscolo scheletrico, con livelli moderati nel cervello, polmone, intestino tenue, rene e placenta.
• Raptor subisce multiple modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, glicazione, ISGilazione (coniugazione Ubl) e formazione di legami isopeptidici, regolando la sua attività e le sue interazioni (Parole chiave: Acetilazione, Glicoproteina, Legame isopeptidico, Fosfoproteina, Coniugazione Ubl).
• È anche associato a interazioni ospite-virus ed esiste in isoforme con splicing alternativo, espandendo la sua diversità funzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 888-1013 di Raptor umano, una regione che potrebbe essere conservata tra le specie; convalidare la reattività crociata nei vostri modelli.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda vicino a 149 kDa; ottimizzare le condizioni di trasferimento per le proteine di grandi dimensioni.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo dell'anticorpo in formato di cattura o rilevamento; le diluizioni ottimali devono essere determinate sperimentalmente.
• Essendo un anticorpo policlonale, può offrire una robusta amplificazione del segnale; tuttavia, convalidare la specificità nei controlli knockout o knockdown.
• L'anticorpo reagisce con Raptor umano, murino e ratto; se si utilizzano altre specie, verificare l'omologia di sequenza della regione immunogenica.

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