Rat anti-Mouse CD3 Monoclonal Antibody for Flow Cytometry - P04235 / P22646

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD3 (catene delta ed epsilon)

• Il CD3 delta (gene Cd3d) ed epsilon (Cd3e) sono componenti essenziali del complesso recettore delle cellule T (TCR)-CD3 sulla superficie dei linfociti T, svolgendo un ruolo centrale nell'immunità adattativa.
• Il complesso CD3 (catene delta, epsilon, gamma e CD247/zeta) trasduce segnali di attivazione upon impegno del TCR da parte delle cellule presentanti l'antigene, tramite fosforilazione dei motivi di attivazione basati sulla tirosina dei recettori immunitari (ITAM) nei loro domini citoplasmatici.
• CD3D è critico per la differenziazione dei timociti e per la corretta espressione superficiale del complesso TCR-CD3; la sua interruzione compromette lo sviluppo delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:10935641
• Il CD3 delta interagisce con i corecettori CD4 e CD8, collegando funzionalmente il riconoscimento del TCR alla segnalazione del corecettore, richiesta per l'attivazione e la selezione positiva delle cellule T CD4+ o CD8+.
• Sia le catene CD3 delta che epsilon sono glicoproteine transmembrana di tipo I localizzate alla membrana plasmatica.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la formazione di legami disolfuro, la glicosilazione e la fosforilazione degli ITAM da parte delle chinasi della famiglia Src LCK e FYN.
• Insieme, le catene CD3 delta ed epsilon hanno pesi molecolari di circa 19 kDa e 21 kDa, rispettivamente.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Il coniugato fluorescente consente la rilevazione diretta in citometria a flusso (FC) senza la necessità di reagenti di colorazione secondari.
• Per ridurre il legame non specifico, considerare la pre-incubazione delle cellule con un reagente di blocco appropriato per il recettore Fc e utilizzare un controllo isotypico IgG di ratto abbinato.
• Ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo mediante titolazione su un intervallo (es. 0,1–5 µg/mL) nel sistema cellulare pertinente per ottenere il miglior rapporto segnale-rumore.
• Preparare sospensioni di cellule singole e valutare la vitalità prima della colorazione per garantire risultati robusti e riproducibili.
• L'anticorpo è raccomandato per l'uso con campioni murini; validare le condizioni del saggio per la tua specifica configurazione sperimentale.

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