Anticorpo monoclonale di ratto contro CD45R/B220 di topo per citometria a flusso - P06800 / P08575

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD45R/B220

• La protein tirosina fosfatasi di tipo recettore C (PTPRC), comunemente nota come CD45, L-CA, Ly-5 o T200, è una glicoproteina transmembrana. L'isoforma B220 è espressa specificamente nei linfociti B e corrisponde alla variante ad alto peso molecolare di CD45.
• CD45 è essenziale per l'attivazione dei linfociti T tramite il recettore dei linfociti T (TCR), agendo come regolatore positivo della coattivazione dei linfociti T dopo il legame con DPP4. Il primo dominio fosfatasi possiede attività enzimatica, mentre il secondo influenza la specificità per il substrato.
• Dopo l'attivazione dei linfociti T, CD45 recluta e defosforila SKAP1 e FYN, e defosforila anche LYN, modulando di conseguenza le loro attività chinasi.
• All'interno della sinapsi immunologica, CD45 interagisce con CLEC10A sulle cellule dendritiche immature; questa interazione riconosce CD45 che porta l'antigene Tn sui linfociti T effetori e contribuisce alla modulazione delle soglie di attivazione dei linfociti T, aiutando a prevenire l'autoreattività.
• CD45 si localizza sulla membrana cellulare, nelle zolle lipidiche di membrana e nella sinapsi immunologica, in linea con il suo ruolo nella trasduzione del segnale durante il contatto cellula-cellula.
• L'alternative splicing genera multiple isoforme di CD45 (ad esempio CD45R, CD45RO, B220), che sono espresse in modo diverso tra le sottopopolazioni di leucociti e influenzano i risultati della segnalazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono estesa glicosilazione N- e O-linked e fosforilazione, che regolano l'attività fosfatasi e l'espressione superficiale.
• La CD45 di topo è codificata dal gene Ptprc (Ly-5). L'anticorpo descritto qui presenta reattività crociata con CD45R/B220 di topo.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'anticorpo è coniugato con , un fluoroforo eccitabile da laser viola. Verificare che il vostro citometro a flusso sia dotato di un laser a 405 nm e di filtri di emissione appropriati (ad esempio, passabanda 450/50) per una rilevazione ottimale.
• Secondo il fornitore, l'anticorpo presenta reattività crociata con CD45R/B220 di topo. Se lavorate con campioni umani o di altre specie, eseguite appropriati test di reattività crociata prima dell'uso.
• CD45R/B220 è espresso prevalentemente nei linfociti B; includete controlli di colorazione positivi (ad esempio splenociti o linee cellulari B) e negativi (ad esempio linfociti T) ben caratterizzati per confermare la specificità nei pannelli di citometria a flusso.
• L'immunogeno utilizzato per la generazione include un peptide da CD45R/B220 di topo/umano; pertanto, l'anticorpo potrebbe teoricamente riconoscere CD45R/B220 umano. Si raccomanda la validazione nella specie e nel sistema di campionamento pertinente.
• I pesi proteici di 130–144 kDa rappresentano diverse isoforme di CD45. Per applicazioni diverse dalla citometria a flusso (ad esempio Western blotting), assicuratevi di avere marcatori di peso molecolare appropriati e tenete conto che questo prodotto è validato solo per FC.
• Conservate e maneggiate l'anticorpo come raccomandato per i coniugati fluorescenti; al momento della ricezione, il prodotto viene spedito con sacchetti di ghiaccio per mantenere la stabilità.

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